Beutler改良法测定组织GSH操作规程参考模板范本.doc

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Beutler改良法测定组织GSH操作规程Beutler改良法测定组织GSH操作规程一、 原理及意义原理:DTNB能被-SH基团还原,产生等克分子的2-硝基-5-巯基苯甲酸,而苯甲酸阴离子在一定PH值条件下呈黄色,在412 nm波长下有吸收峰。意义:还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)是一种低分子自由基清除剂,它可清除O2 、H2O2、LOOH。GSH是蛋氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种小分子肽,是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物,并且是谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)两种酶类的底物,为这二种酶分解氢过氧化物所必需,能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤,最近还证明GSH也参与使Vit E恢复到还原态的作用。GSH测定值的高低可间接反映机体发生氧化损伤的程度。二、 器材可见光分光计、7 ml离心管和管架、加样器和枪头三、 试剂 1 mmol/L的GSH(标准品); 1柠檬酸钠; 二硫双基苯甲酸(dithio-bis-nitrobenzoicacid, DTNB)试剂:用1柠檬酸钠配成

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