一些分子生物学实验小技术汇编 1保存菌种保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种,挑取分隔良好的单克隆接种于2-10 ml 中(如菌种含质粒则应加抗生素)摄氏度快摇小时,按0.1%-0.5% 比例转种,培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量,以保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时,读数值在0.1-0.5 范围内为线性相关,超过该范围的应作稀释。通常升的过夜培养12-16h,湿重为3 g左右,密度往往是3-4 109 个细胞每毫升培养物离心收菌后可在-20摄氏度冻存数周。 2TSS 法快速转化大肠杆菌 A过夜培养物转种后27拚度快摇约205hrs至O.D 值为0.3 左右。 B取ml菌液离心收菌,加入0.1ml 冰浴的1 TSS 液轻轻吸打悬起细胞。(可以放-70 摄氏度冻存半年)B 、可以取0.1ml 菌液加入0.1ml 冰浴的2 TSS 混匀,该方法只适于做质粒转化,如做连接产物转化请按做。 C加100pg-10ngDNA 混匀。冰浴10min ,室温放置10分钟再次冰浴10mins. D加1m