电子显微镜使用方法.doc

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资源描述

五、电镜标本制作方法 电镜标本用于观察组织细胞的超微结构。扫描电镜用于细胞表面的观察,透射电镜用于细胞内部结构的观察。现以透射电镜标本的制作为例作简要介绍: (一)取材 标本的新鲜程度要求高于光镜标本,组织块小于lmm3。 (二)固定 常用的固定液有25戊二醛磷酸缓冲液和1锇酸。这些液体穿透力较强,能稳定和保存细胞内的结构。固定温度应控制在04,固定时间12小时。 (三)冲洗 冲洗液由02molL磷酸缓冲液(pH7.2)与双蒸水等量混合配成。冲洗组织块2次间隔15分钟。 (四)脱水 脱水剂多采用浓度递增的酒精和丙酮,从50 70 90酒精 1/2 90酒精+1/2 90丙酮混合液 90丙酮(以上步骤均在04冰箱中进行) 100丙酮,间隔1015分钟。 (五)包埋 包埋剂为环氧树脂618或812和固化剂十二碳烯基丁二酸酐(简称DD-SA),加入适量增塑剂苯甲酸二丁酯(简称DDP)。为了使反应速度增快,可加入加速剂2,4,6-三(二甲氨基)甲基苯酚(简称D

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