血红蛋白的提取和分离基础知识 蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分了的亲和力,等等,可以用来分离不同种类的蛋白质。在本课题中,我们将学习蛋白质分离方法中的凝胶色谱法。 (一)凝胶色谱法凝胶色谱法也称做分配色谱法,是根据相对分予质量的大小分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的,如葡聚糖或琼脂糖。在小球体内部有许多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离(图513)。相对分于转小的蛋相对分彳较大的蛋a相对分予质量较小的蛋Fi质由于扩敞作用进入凝胶颗粒内部而被滞留;相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。b-(1)蛋白质混合物i柱;(2)洗脱开始,相对分子质趋较小的蛋白质扩散进