1、第一章 绪论 1. 细胞的大小及体积的恒定取决于： 1.体积与表面积的关系 2.细胞内关键分子的浓度 2. 真核细胞膜的结构体系 ：生物膜体系；细胞骨架体系；遗传信息表达体系 第二章 细胞生物学研究方法 1.分辨率： r=0.61/n sin 提高分辨率 （放大倍数）：减小 ；增大角孔径越大；增大介质折射率； 3. 显微镜结构：照明系统 光学放大系统 机械装置 倒置显微镜不同点在于物镜与照明系统的位置颠倒，用于显微操作。 电子显微镜：透射电子显微镜、扫描电子显微镜 4. 细胞膜的不对称性研究方法 ：冷冻蚀刻技术 5. 细胞系 （ cell line）：原代培养细胞经首次传代成功即为细胞系。 6
2、. 细胞株 （ cell strain）：从培养细胞中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。 7. 克隆（ clone）：指由同一个原始细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。 8. 动物细胞培养方法 ：贴壁培养、悬浮培养 培养特性 ：细胞贴壁、接触抑制 9. 离心分离技术 ：速度离心、等密度离心 速度离心：用途：分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。 原理：被分离物质体积的差异 速度离心分为差速离心和移动区带离心 差速离心：特点：介质密度均 一；速度由低向高，逐级离心。 移动区带离心：介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。 原理：介质密度梯度平缓，分离物按各自的沉降系
3、数以不同的速度沉降而达到分离。 等密度离心：用途：分离密度不等的颗粒。 原理：样品各成分在连续梯度的介质中经过一定时间的离心则沉降到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的成分分离。 分离细胞的组分或生物大分子操作原则： 体积和沉降系数差别大，差速离心；密度差别大，密度梯度离心 10. 层析分离技术：分离蛋白质 凝胶过滤层析：根据蛋白质的大小和形状 亲和层析：根据生物分子间的特异结合 离子交换层析：根据蛋白质所带电荷的差异 11. PCR 技术 ：聚合酶链式反应，用于扩增目的 DNA 第三章 细胞质膜与跨膜运输 1.细胞质膜 : 膜脂 +膜糖 +膜蛋白 2.膜脂主要包括磷
4、脂、鞘脂和胆固醇三种类型。 3.脂质体 ：能够在水溶液中自我装配成脂双层的球状结构，这种结构称为 脂质体可用作生物膜的研究模型，并可作为生物大分子与药物的运载体，因此脂质体不仅是研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质的极好材料，同时在基因转移药物治疗方面有着诱人的应用前景。 4.膜 糖：细胞质膜上所有膜糖都位于质膜外表面，内膜中的膜糖则位于内表面 ABO 血型抗原是一种糖脂 , 其寡多糖部分具有决定抗原特异性的作用。 ABO 血型决定子是短的、分支寡糖链， A血型的人具有一种酶，能将 N-乙酰半乳糖胺添加到糖链末端；B血型的人具有在糖链末端添加半乳糖的酶， AB血型的人具有上述两种酶； O 血型的人缺
5、少上述两种酶。 5.膜蛋白 ：整合蛋白、外周蛋白、脂锚定蛋白 跨膜蛋白（整合蛋白）的跨膜区为一般为螺旋 , 也有的是折叠，如孔蛋白； 外周蛋白可用高盐或碱性 pH条件分离；最容易分离出来。 6 膜蛋白功能： .运输蛋白：转运特殊的分子和离子进出细胞；酶：催化相关的代谢反应 ; 连接蛋白：连接作用；受体：起信号接收和传递作用。 7.膜蛋白研究方法 ：膜蛋白分离：用去垢剂分离小的跨膜蛋白 离子型去垢剂十二烷基磺酸钠 SDS：可使细胞膜崩溃，并与膜蛋白疏水部分结合，而且破坏膜内部蛋白非共价键，使蛋白质变性，故不宜用于分离膜蛋白。 非离子型去垢剂 Triton-X100：是常用温和型去垢剂，溶解膜脂，
6、蛋白质不变性。 膜蛋白在膜中位置测定：对蛋白质进行标记或修饰实验 膜蛋白功能测 定：脂质体法 8.细胞膜的特性 ：膜不对称性：表现在膜脂分布、膜蛋白分布、膜糖分布的不对称性 研究方法： 冷冻断裂（蚀刻）技术 、放射性标记法、脂酶处理法 膜的流动性：由脂和蛋白质的流动引起 研究方法：人鼠细胞融合实验、淋巴细胞的成斑和成帽反应、荧光漂白恢 复、电子自旋共振谱技术 9.影响膜流动性的因素 ：了解（选择题） 胆固醇：相变温度以上，胆固醇的含量增加会降低膜的流动性；相变温度以下则相反 脂 肪酸链的饱和度：脂肪酸链所含双键越多越不饱和，使膜流动性增加。 脂肪酸链的链长：长链脂肪酸相变温度高，膜流动性降低。
7、 卵磷脂 /鞘磷脂：该比例高则膜流动性增加。 相变温度越高，流动性越弱。 10.物质运输种类：小分子 穿膜运输：被动运输：简单扩散、协助扩散；主动运输 大分子 膜泡运输：内吞作用：吞噬作用、胞饮作用；外排作用 11.物质穿透能力（选择题） 脂溶性越强越易直接穿膜，如：甾类激素、苯； 小非极性分子能直接穿膜，如： O2、 N2；脂溶性与分子大小比，前者影响更大。 不带电荷的小 极性分子能直接穿膜，如： H2O、乙醇、尿素、甘油 不带电的大的极性分子和各种离子不能直接穿膜，需依赖运输蛋白。如：葡萄糖、 Na+ 12.物质穿膜运输小结 . 跨膜运输： 小分子、离子等物质穿越质膜的运输 区别： 主动运
8、输是物质从高浓度向低浓度运输，需消耗 ATP； 被动运输是物质通过扩散由高浓度向低浓度，不消耗 ATP 主动运输的意义 ：保证了细胞或细胞器从周围环境中或表面摄取必须的营养物质，即使这些营养物质在周围环境或表面浓度很低；能将细胞内各种物质 排到细胞外，即使这些物质在细胞外浓度比细胞内浓度高得多；维持一些无机离子在细胞内恒定和最适浓度。 被动运输的意义： 被动运输可能使细胞在不消耗能量的情况下获得自己所需要的物质 ， 保证了生命体各种生理活动的有序进行 。 12.离子载体：通道形成离子载体：短杆菌肽 A 离子运载离子载体：缬氨霉素 14. 细胞质膜通透性的选择性 （选择题）：脂溶性：脂溶性越强，
9、越易通过； 分子大小：越小越好，能够扩散的最小分子是水分子； 带电性：带电荷的分子或离子不能自由扩散。 15. 离子通道类型：电压门控通道 : 闸 门的开闭受膜电压控制 配体门控通道 : 闸门的开闭受化学物质 (配体 )调节 机械门控通道：通道的打开受力的作用。 16.离子分布 ：钙离子分布胞外和内质网；钠离子细胞外；钾离子细胞内 （电位：外正内负） 17.协同运输 ：一种物质的逆浓度梯度穿膜运输依赖于另一种物质的顺浓度梯度的穿膜运输，二者协同进行，是一种间接消耗 ATP 的主动运输方式。 第四章 细胞环境与互作 1.细胞外基质：细胞向细胞外分泌的一群大分子，这些大分子在细胞间交织连接形成网状
10、结构，称为 分为 ：蛋白聚糖：糖胺聚糖 M 期 ,即有丝分裂期 2.细胞类群 ：持续分裂细胞；终端分化细胞：永久性失去了分裂能力的细胞； G0 细胞：又称休眠细胞，暂时脱离细胞周期 ,不进行增殖 ,也叫静止细胞群，如某些免疫淋巴细胞 , 肝 ,肾细胞等。 3.诱导同步法 ：胸腺嘧啶阻断技术：高浓度胸腺嘧啶阻断 S 期 中期阻断法：秋水仙素阻断有丝分裂中期 4.促成熟因子 ： M 期细胞 中促进细胞分裂的因子 组成： CDK（细胞周期蛋白依赖性激酶）；调节 CDK功能的 Cyclin（细胞周期蛋白） 催化亚基和调节亚基组成的异质二聚体 作用机制： MPF 的蛋白激酶亚基将某些特异蛋白质磷酸化，故
11、能够诱导细胞进入有丝分裂。促进染色体凝集；核纤层磷酸化，核被膜解体；高尔基体和内质网片段化；纺锤体形成 5.蛋白质的寿命与降解： 1.蛋白质的寿命信号： N 端规则 2.蛋白酶体参与的蛋白质降解：降解类型：错误折叠；数量调控 泛素蛋白： 76AA，泛素标签 6.细胞周期中的三个主要关卡 ： G1 关卡 (靠近 G1 末期 )； G2 关卡 (在 G2 期结束点 )； 中期关卡 (在中期末 ) G1 关卡是细胞周期的主要控制点 ,它决定着细胞能否分裂； G2 关卡控制系统检测细胞大小、细胞所处状态及细胞内 DNA 是否复制完毕；中期关卡控制系统检测所有染色体是否都与纺锤丝相连，并排列赤道板上；否
12、则不能进行有丝分裂和胞质分裂。 意义：这些关卡严格监视着细胞时间的发生、发展过程是否按程序进行，保 证了细胞周期正常进行。 第十三章 胚胎发育与细胞分化 1.细胞分化是指同一来源的细胞逐渐发生各自特有的形态结构，生理功能和生化特征的过程。 本质是基因选择性表达的结果。 2.干细胞 一类具有自我更新能力的多潜能细胞，在一定条件下可以分化为多种功能细胞。 3.持家基因 ：维持细胞最低限度不可少的基因，在所有类型细胞都能表达。 奢侈基因 （组织特异性基因）：在各种组织内进行不同选择性表达的基因。 4.细 胞凋亡 （程序性细胞死亡）：为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序性的死亡。 细胞死亡 ：细胞生命现象不可逆的停止。
