几种常用的固定剂.doc

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几种常用的固定剂 固定剂最先应用在光学显微技术中,但光学显微镜中使用的沉淀凝集蛋白性的固定剂对电镜并不特别适用。于是人们引入四氧化锇和中性甲醛进行固定。早期的电镜生物样品化学固定法都采用四氧化锇单一固定,但四氧化锇不能很好地保存糖原和其它碳水化合物,而且四氧化锇在组织中的渗透速度比较慢(约2mm/h)。而早期使用的中性甲醛也令人很不满意,因为早期使用的甲醛很不纯,含有甲酸和甲醇的残留(一般有10-15),甲醇的存在对样品的保存很不利,于是后来人们改进了甲醛的制备方法,使用多聚甲醛新鲜配制甲醛,提高了它的纯度。1963年Sabatini、Bensch和Barrnett推荐使用醛类(特别是戊二醛)作为初级固定剂。使用戊二醛或戊二醛-多聚甲醛初步固定后再使用四氧化锇后固定的双重化学固定对大多数动物和植物组织都十分有效,因而成为目前大多数实验室常规的固定方法。电镜中使用的固定剂都有毒性,操作时都要很小心,尽可能在通风橱中完成操作。如果实验室中发生固定剂泄漏,必须立即用大量奶粉覆盖泄漏出来的溶液,待反应充分后收集处理。 四氧化锇(Osmium tetroxide)

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