重组质粒的构建、转化和重组子的筛选与鉴定.docx

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资源描述

重组质粒的构建、转化和重组子的筛选与鉴定姓名:郑小煜学号:9班级:11级生技班同组者:赵莉、高瑞【实验目的】1、 学习在实现DNA的体外重组过程中,正确选择合适的载体和限制性内切酶,并利用限制性核酸内切酶对载体和目的DNA进行切割,产生利于连接的合适末端。 2、 通过对DNA的酶切,学习设计构建重组DNA分子的基本方法,掌握载体和外源目的DNA酶切的操作技术。3、 学习利用T4 DNA连接酶把酶切后的载体片段和外源目的DNA片段连接起来,构建体外重组DNA 分子的技术,了解并掌握几种常用的连接方法。4、 掌握利用CaCl2 制备感受态细胞的方法。5、 学习并掌握热击法转化E.coli的原理和方法。 6、 在使用红白菌落法筛选获得重组子的基础上,本实验学习通过对重组子进行重组质粒DNA的抽提鉴定,以进一步确定重组质粒中含有外源目的DNA片段,验证重组子是期望的重组子的方法。7、 通过学习掌握重组DNA分子鉴定的基本方法。8、 掌握互补筛选法筛选重组子的方法。并鉴定体外导入目的DNA片段的大小。 9、 学习用试剂盒提取

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