产植酸酶黑曲霉菌株S8的基因扩增与鉴定曾 秀1，郭万柱2，孔路军1，王孝友1（1.重庆市养猪科学研究院，重庆 荣昌 ；2.四川农业大学动物科技学院，四川 雅安 ） 摘要：本文主要报道了用三种不同方法从S8黑曲霉菌丝体中提取基因组DNA，最适方法是经改进的Vitagene试剂盒法。PCR扩增效果最好的是设计时没有去掉phyA基因内含子的引物，获得的特异性PCR产物长约1.5kb。同时对PCR反应体系进行了优化。对扩增出的目的片段用三种不同方法进行纯化回收，结果是PCR Fragment Recovery Kit法回收效果最好，其产量可达到约10ng/L。根据已报道的植酸酶sPhyA基因序列酶切位点，对回收的目的片段进行酶切鉴定，该基因能被BamH、Sal酶切，不能被Hind、Xbal、KPn酶切，与已知的phyA基因酶切图谱基本一致，进一步判定PCR扩增产物中含有植酸酶phyA基因。关键词：植酸酶；PCR；PhyA基因；酶切分析植酸（phytic acid）即肌醇六磷酸，是植物种子中肌醇和磷的主要存在形式，60%80%的磷以植酸盐的形式存在，但这些磷
