核酸抽提的基础近日撰写了一个关于核酸抽提的基础现状的草稿;没有去找参考书润色,所以会有点凌乱。首先声明的是:这篇东西只为有一定核酸抽提基础知识的人准备,同时也将会及时修改。那些分子生物学的过客,最好不要看本文;一是我的思维有点跳跃,二则是没有必要糟蹋自己的时间。写这篇东西的另外一个原因是,我一直在思考如何简化经典的无介质的核酸抽提程序。最经典的是裂解一步,去蛋白质一步,核酸沉淀一步;DNAzol 将这三步并成了一步,按道理已经简化到了极致。事实是,DNAzol 并没有被大家认可,其原因大概还是质量不太可靠吧。现在也有使用Proteinase K 消化后直接沉淀核酸的方法,三步简化成了两步,可我总觉得醇的沉淀不可能彻底去除 Proteinase K。明年大概还没有生物学的诺贝尔奖会花落中国的,那么先求得一个核酸抽提最简单的非介质方法世界领先如何?一笑!也一定。 1、核酸抽提原理 简单地讲,核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程,纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。经典的裂解液几乎都含有去