核酸的提取与纯化一 DNA的提取与纯化(一) 实验目的与主要原理DNA存在于细胞核中。通过裂解组织与细胞,使细胞膜破碎,暴露出DNA与蛋白质的混合物。此时,通过蛋白酶的消化,使DNA与蛋白质进行分离,而后利用硅胶柱或者酚:氯仿法,去除蛋白质,从而提取高纯度DNA。(二) 实验材料蛋白质K(20mg/ml),裂解液(100mmol/l Tris(pH 8.0),500mmol/L EDTA(pH 8.0),20mmol/l NaCl,10% SDS),硅胶柱,TE(10mmol/l Tris-HCl,1mmol/L EDTA(pH 8.0),0.5*TAE (20mmol/l Tris-乙酸,0.5mmol/l EDTA,pH 8.0),10*Loading buffer(50mmol/l EDTA,60%甘油,0.25%溴酚蓝,pH 7.0)。(三) 实验方法DNA提取的方法目前主要有两种,一种是利用酚:氯仿抽提的方法,另一种是利用硅胶柱吸附的方法。其中酚:氯仿抽提法由于试剂具有较强的腐蚀性和毒性,且对环境污染较大,目前使用者较少。而硅胶柱的方法操作比较简单