浙江大学生物化学实验甲 酵母蔗糖酶的制备及其动力学性质分析.doc

酵母蔗糖酶的制备及其动力学性质分析一、蔗糖酶(invertase or sucrase)简介蔗糖酶（EC.3.2.1.26）为水解酶类，主要存在于植物和微生物体内，专一性地催化蔗糖水解为果糖和葡萄糖的反应。酵母蔗糖酶分子量约D，pI约50，最适pH46，耐酸和热，50保温30min仍具有相当的活力，最适温度37。耐乙醇，因此可用乙醇沉淀进行分离纯化。二、酵母蔗糖酶的分离纯化本试验分离纯化酵母蔗糖酶分四步：甲苯抽提。加热纯化。乙醇分级沉淀。纤维素柱层析分离纯化。、前三步分离纯化的原理如下： 甲苯 石英砂 离心 上层（甲苯层）：脂溶性物质酵母细胞 破细胞 中层（水层）：蔗糖酶，可溶性糖等研磨 下层（沉淀）：细胞碎片、变性蛋白等 取中