抗冻基因CBF2表达载体构建及转化紫花蓿摘要: 以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamH和Sac分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。关键词: 抗冻基因CBF2;载体构建;农杆菌;紫花苜蓿;转化正 文： CBFs(冷诱导基因)由一个小的基因家族编码,包含3个成员CBF1、CBF2和CBF3,3个基因都聚集在拟南芥的4号染色体短臂上,紧密连锁在一起,均可在冷胁迫下迅速诱导表达。CBF这一冷驯化关键调节基因的发现,对植物逆境胁迫生理和抗逆植物基因工程研究产生了一定影响。CBF在植物中是相当保守的,即使是对冻害敏感的番茄(Lycopersicon esculentum),也存在具功能的CBF基因。另外,过量表达CBF除了提高拟南芥(Arabidopsis thaliana)抗冻能力外,也增
