1、色 谱基础 知识色谱基础知识几 个基本概念:Chromatography:色谱法,一种分离和分析的方法Chromatograph: 色谱仪,以色谱法为原理的分析仪器Chromatogram: 色谱图,色谱仪生成的分析结果色谱基础知识Chromatography 色谱法:色谱法是一种分离和分析方法,又叫层析法,它利用不同物质在不同相态间的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。色谱法最初由俄国植物学家茨维特创立。色谱基础知识茨维特实验 :1903年,茨维特做了一个植物色素分离实验:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植
2、物叶的提取液)的石油醚倒入管中。 此时,玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动,并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素,并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。色谱基础知识色谱法的分类:1)以流动相形式分类,可分为 气相色谱法 和 液相色谱法 。什么是流动相?什么是固定相?色谱分析过程中用于携带待测组分向前移动的物质称为 流动相 ( mobile phase)。在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的物质称为 固定相 ( stationary phase)。色谱基础知识色谱法的分类:2)以固定相形式分类,可为 柱
3、色谱法 、 纸色谱法 、薄层 色谱法 。3)以分离原理分类,可分为 吸附色谱法 、 分配色谱法 、 离子交换色谱法 、 尺寸排阻色谱法 、 亲和色谱法等。色谱基础知识色谱法分离原理色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。在分离过程中,待分离物质中的不同组分在流动相和固定相之间的分配会不同,这使其随流动相运动速度各不相同,随着流动相的运动,混合物中的不同组分在固定相上相互分离。色谱基础知识色谱法分离原理示意图时间检测器色谱柱进 样 口A BA B | 一 BB|BA| 一B| BA| 一B| 峰 A 峰 B色谱基础知识一些色谱图相关的术语:1)色谱图:在分析过程中色谱仪记录下来的检测器信号随时间变化的曲线。(一般纵坐标为信号值,横坐标为时间)2)基线:在不分析状态下色谱仪检测器信号随时间变化的曲线。3)色谱峰:在分析过程中,当某一组分流过检测器时,检测器信号随之产生变化,在谱图上即表现为峰状,称之为色谱峰。色谱基础知识一些色谱图相关的术语:4)峰高:某一色谱峰顶点与基线的距离(信号差值)。5)峰宽:某一色谱峰底部的宽度。(即从 色谱 峰 开始到结束的时间。)6)峰面积:某一色谱峰与峰底基线所围成区域的面积叫峰面积。峰面积是色谱法定量的依据。7)保留时间:某一组分从进样到该组分色谱峰到达顶点的时间。保留时间是色谱法定性的依据。