1、 - 1 - 广东海洋大学分子生物学复习题 第一章 绪论 中心法则（ central dogma） 答： DNA 通过复制将遗传信息由亲代传递到子代，通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。蛋白质的复制、转录和翻译过程就构成遗传学的中心法则。 第二章 染色体与 DNA 一、填空题 1. 线粒体 DNA 的复制为 _D 环 _方式，大肠杆菌染色体的复制为 _ 型 _方式， X174 环状染色体和噬菌体 DNA 后期复制为 _滚环 _方式，真核生物染色体复制为 _多起点双向线形 _方式。 2. DNA 的二级结构为 _DNA 双螺旋 _。 3. 在真核细 胞中 DNA 的
2、三级 结构为 _核小体 _结构， 它由 140bp 的 DNA 缠 绕于由_H2A/H2B/H3/H4 各两个 _组成的八聚体外，又以 60bp的 DNA 及 _H1_形成的细丝相连组成串珠状结构。 4. 在 DNA 合成过程中改变 DNA 分子超螺旋构型的酶是 _拓扑异构酶 _。 5. 原核生物 DNA 聚合酶有三 种，其中参与 DNA 复制的是 _DNA 聚合酶 1_和 _DNA 聚合酶3_，参与 DNA 切除修复的是 _DNA 聚合酶 1_。 6. 紫外线照射可在相邻的两个 _胸腺 _嘧啶间形成 _嘧啶二聚体 _。 7. 在同源重组过程中，常常形成 _Holliday_中间体。 8. 大
3、肠杆菌整个染色体 DNA 是 _环状 _的，它的复制开始于 _oriC_，复制的方向是_5 端向 3 端 _，复制的机制是 _半保留半不连续 _。 9. 假如将 15N标记的大肠杆菌在 14N培养基中生长三代，提取其 DNA，进行 CsCl密度梯度离心，其 15N,14N-DNA分子与纯 14N-DNA 分子之比为 _1:3_。 10. 在真核生物中 DNA 复制的主要酶是 _DNA 聚合酶 _。 11. 在聚合酶链式反应中，除了需要模板 DNA 外，还必须加入 _DNA 聚合酶 _、 _dNTP_、_引物 _、和镁离子。 12. DNA 复制时，合成 DNA 新链之前必需合成 _RNA 引物
4、 _，它在原核生物中的长度大约有_610 个碱基 _bp。 13. DNA 复制的两大特点是 _ 半保留 _和 _ 半不连续 _。 14. DNA 复制和修复的模板是 _DNA_，原料是 _4 种脱氧核苷酸 _。 15. 引起 DNA 损伤的因素有 _自发因素 _、 _物理因素 _和 _化学因素 _等。 二、选择题 1. DNA 复制中解开双螺旋的酶是（ B ）。 A.拓扑酶 B. 解螺旋酶 C. DNA 结合蛋白 D. 连接酶 2. DNA 受热变性时（ D ）。 A. 在 260nm 波长处吸光度下降 B.多核苷酸链断裂 C. 碱基对可形成共价连接 D.加入互补 RNA 链冷却可形成 DN
5、A:RNA 杂交分子 3. 下列序列中，在双链状态下属于完全回文结构的序列是（ C ）。 A. AGTCCTGA B.AGTCAGTC C. AGTCGACT D.GACTCTGA 4. 有关 DNA 结构的正确说法是（ D ）。 A. 双螺旋的两股链是相同的 B. 双螺旋两股链平行，也即走向同一方向 - 2 - C. 双螺旋中的碱基平行于螺旋的轴 D.双螺旋的两股长链以反向平行方式盘绕 5.真核生物复制起点的特征包括（ B ）。 A.富含 G-C 区 B. 富含 A-T 区 C. Z-DNA D. 无明显特征 6.插入序列（ IS）编码（ A ）。 A.转座酶 B. 逆转录酶 C. DNA
6、聚合酶 D. Klenow 酶 7. 原核 生物基因组中没有（ A ）。 A.内含子 B. 外显子 C. 转录因子 D. 插入序列 8. 自然界中以 DNA 为遗传物质的大多数生物 DNA 的复制方式是（ C ）。 A.环式 B. D 环式 C. 半保留 D.全保留 9. 关于组蛋白下列说法正确的是（ D ）。 A.为中性蛋白 B.为酸性蛋白 C.进化上不具保守性 D. 染色体结合蛋白 10.构成染色体的基本单位是（ B ） . A DNA B. 核小体 C. 螺线管 D. 超螺线管 11. 下列属于 DNA 自发损伤的是（ A ）。 A.DNA 复制时的碱基错配 B. 紫外线照射 DNA 生
7、成嘧啶二聚体 C.亚硝基盐使胞嘧啶脱氨 D. 双功能烷化剂使 DNA 交联 三、名词解释 semiconservation replication 半保留复制 在复制过程中双螺旋 DNA 解旋并分开，然后以每条链为模板，按碱基互补配对原则，由 DNA 聚合酶催化合成新的互补链，结果由一条链合成为互补的两条链，这样新形成的两个 DNA 分子与原来的 DNA 分子的碱基序列完全相同。由于每个子代 DNA 的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新和成的。这种复制方式称为半保留复制。 semidiscontinuous replication 半不连续复制 以纺织叉移动的方向为基准，一条模板链是 3 端
8、向 5 端，以此为模板新生成的 DNA 链合成沿 5 端向 3 端方向连续进行，另一条模板链的方向为 5 端向 3 端，以此为模板的新链合成方向也是 5 端向 3 端，但与复制叉前进方向相反，可以先分段不连续合成冈崎片段，冈崎片段再由 DNA 连接酶连接成完整的 DNA 链，这种合成方式被称为 DNA 合成的半不连续复制。 IS 插入序列 是最简单的转 座子，不含任何宿主基因，它们是细菌染色体或质粒 DNA 的正常组成部分（ ： IS1）。 IS 序列是可以独立存在的单元，带有介导自身移动的蛋白质。 C 值勃理 C 值是一种生物的单倍体基因组 DNA 总量。由于真核细胞基因组中含有大量的重复序
9、列，造成物种的 C 值和它的进化复杂性之间无严格的对应关系，这种现象称为 C 值悖论。 DNA 的变性与复性 变性是 DNA 双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程，复性是热变性的 DNA 缓慢冷却、单链恢复成双链的过 程。 核小体 核小体是由直径 2nm 的 DNA 双螺旋链绕组蛋白形成直径为 11nm 的核小体“串珠”结构，是染色体基本结构单元。每个单元中含义 H2A/H2B/H3/H4，各两分子（它们构成一个八聚体）， 1 分子 H1,。染色质中的 DNA 双螺旋链一般为 18200bp，等距离缠绕组蛋白八聚体形成众多核心颗粒，各颗粒之间为带有H1 组蛋白的连接区 DNA。 冈崎片段 D
10、NA 复制合成滞后链时候首先合成的短 DNA 片段。 Transponson 存在于细菌染色体 DNA 上可以自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子，前 者末端具有倒转重复序列，后者两端是插入序列，中间含义宿主基因。 复合转座子 一类带有某种抗药性基因（或其它宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的 IS 序列， IS 序列插入到某个功能基因两端时候就可能产生复合转座子。 反转录转座子 以 RNA为中介通过反转录成 DNA后进行转座的可动元件。 四、问答题 1. 为什么 DNA 复制时，只有一条新链（前导链）是连续复制的，而另一条新链（滞后链）只能是断续复制？并简述滞后
11、链复制的各个步骤。 - 3 - 答： 1.DNA 双螺旋的两条链是反向平行的，在复制叉附近解开的 DNA 链一条是 5 端向 3 端，另一条是3 端向 5 端，两个模板极性不同； 2.DNA 聚合酶的合成方向都是 5 端向 3 端，而不是 3 端向 5 端； 3DNA 复制时局部解链暴露出模板链； 4.以 3 端向 5 端为模板的前导链的合成方向是 5 端向 3 端，与复制叉移动方向相同，能连续合成，以 5 端向 3 端为模板的滞后链的合成方向也是 5 端向 3 端，与复制叉前进方向相反，无法直接复制，一定要等前导链开始合成而将其合成模板暴露出来以后，合成才得以进行，因此只能分段地不连续合成。
12、 2. 有哪些酶和蛋白质参与原核生物的 DNA 复制，它们在复制中的生物学功能是什么？ 答： 1.DNA 聚合酶 1 除去冈崎片段上 RNA 引物，完成两个冈崎片段间的 DNA 合成； 2DNA 聚合酶 2 可能在 DNA 的修复中起某种作用； 3.DNA 聚合酶 3 合成新链 DNA 主要的酶； 4.引物酶或 RNA 聚合酶（引发酶） 合成 DNA 复制所需的 RNA 引物； 5 解螺旋酶 DNA 两条链解开； 6.DNA 解旋酶 消除复制叉前进时候带来的扭曲张力； 7.单链 DNA 结合蛋白 防止复性和保护单链 DNA 不被核酸酶降解；8.DNA 连接酶 连接冈崎片段； 9.DNA 拓扑异
13、构酶 消除或引人 DNA 的超螺旋结构 3. 什么是 DNA的 半保留复制？它的实验依据是什么？ 答：在 DNA 复制过程中双螺旋解旋并分开，然后以每条链为模板，按碱基互补配对原则，由 DNA 聚合酶催化合成新的互补链，结果由一条链成为互补的两条链，这样新形成的两个 DNA 分子与原来的 DNA 分子的碱基序列完全相同。由于每个子代 DNA 的一条链来自亲代 DNA，另一条链则是新和成。这种复制方式成为半保留复制。 实验依据： 1958 年， Meselson 和 Stahl 利用同位素标记和密度梯度离心实验，将大肠杆菌放在 15NH4Cl培养基中生长 15 代，使 DNA 被 15N 标记后
14、，再将细菌转移到 只含有 14NH4Cl 的培养基中培养。分别取 0代、 1 代、 2 代、 3 代的细胞，提取 DNA，进行密度梯度离心，结果发现，当含有 15N-DNA 的细胞在 14NH4Cl培养液中培养一代后，只有一条区带介于 14N-DNA 与 15N-DNA 之间，表明 DNA 一条链来自 15N-DNA，另一条链为含有 14N的新合成链；培养两代后则出现两条带，一条带在 14N-DNA区，另一条在 14N-DNA与 15N-DNA之间，按照半保留复制方式培养两代，只能出现 14N-DNA 和 14N,15N-DNA 两种分子；培养三代后则出现三条代，一条带 14N DNA 区，另
15、一条带在 14N DNA 与 15N-DNA 之间，还有一条带在 15N-DNA 区，按照半保留复制方式培育三代，能出现 14N-DNA 14N， 15N-DNA 和 15N-DNA 三种分子，随代数的增加 14N-DNA 逐渐增加而 14N,15N-DNA 区带逐渐减弱。 4. 原核生物中存在哪些类型的转座子？其转座机理有哪些？ 答：转座机理： 复制型转座 在相互作用时，转座子被复制，因此转座实体是原转座子的一个拷贝。转座子中作为移动的部分被拷贝。一个拷贝保留在原味点，另一个位点插入 到新的位点，复制型转座涉及到两种类型的酶活性：一是转座酶，他们在原转座子的末端起作用。另一种为拆分酶，它对复
16、制拷贝起作用。 非复制型转座 转座因子直接从原来 位置插入新的位置，并保留在插入位置上，这中转座只需转座酶的作用。非复制转座的结果是原来的位置上丢失了转座因子，而在插入的位置上增加了转座因子这可能是表型的变化 反转座因子通过在将 RNA 转录成 DNA 拷贝的能力而迁移； DNA 拷贝同时被整合在基因组的新位点，反转座作用在出现在真核生物，所有反转录 转座子都有一个共同的特点，即在其插入微点上产生短的正向重复序列。 5. 简述 DNA复制的过程，并比较原核生物和真核生物 DNA 复制的差异。 答：（ 1） DNA 复制的过程可被分为三个阶段：复制的起始、延伸和终止。每个 DNA 复制的独立单元
17、主要包括复制的起始位点和终止位点。 DNA 复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段， DNA 解旋解链，形成复制叉，引发体组装；在引发阶段，在引发酶的催化下以 DNA 链为模板合成一段短的 RNA 引物。复制时 DNA 链的延伸由 DNA 聚合酶催化，以亲代 DNA 链为模板，引发体移动， 从 5 3方向聚合子代 DNA 链。当子链延伸达到终止位点时， DNA 复制就终止了，切除 RNA 引物，填补缺口，在 DNA 连接酶的催化下相邻的冈崎片段连接起来形成完整的 DNA 长链。 - 4 - （ 2）原核生物和真核生物 DNA 复制的差异： DNA 复制差异项 原核生物 真核生物 复制
18、起始点和单位 单复制子、单点起始 多复制子 100-200bp、多点起始、分段进行复制 复制叉移动速度 快、 5kb/min 慢、 1-3kb/min 复制方向 双向 双向 复制的终止 复制叉相遇即终止 端粒 DNA 聚合酶 E.coliDNA 聚合酶 、 DNA 聚合酶 a、 r、 组蛋白的装配 需要组蛋白全保留装配， 5 种组蛋白形成八聚体核小体 6. 简述 DNA损伤修复的机制 。 答： DNA 损伤以后可以生物体可通过多种修复机制进行修复。 直接修复：又称光复活修复，可见光可以激活光复活酶，由光复活酶识别嘧啶二聚体并与之结合形成复合物，在可见光照射下，酶获得能量，将环丁烷胸腺嘧啶二聚体
19、的丁酰环打开和 6-4 光化物还原成单体，另外甲基转移酶使 O-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止 G-T 配对，使之完全修复。 切除修复，包括碱基 切除修复和核苷酸切除修复。碱基切除修复： DNA 糖苷水解酶能特异性识别常见的 DNA 损伤位点，并特异地切除受损核苷酸上的 N- -糖苷键，在 DNA 链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称 AP 位点；由 AP磷酸内切酶将受损核苷酸的糖苷 -磷酸键切开；利用 DNA 聚合酶切除损伤部位，补上核苷酸；再由 DNA 连接酶将切口连接。核苷酸切除修复：该修复机制由两种不同的酶来发动，一种是核酸内切酶，另外一种是 DNA 糖苷酶。特异性的核酸内切酶或 DNA
20、 糖苷酶识别 DNA 受损部位，并在该部位的 5端作一切口；由核酸外切酶从 5 3端逐一切除损伤的 单链；在 DNA 聚合酶的催化作用下，以互补链为模板，合成新的单链片段以填补缺口；由 DNA连接酶催化连接片段封闭缺口。 重组修复：重组修复发生在 DNA 复制之前，而当 DNA 发动复制时尚未修复的损伤部位， DNA 复制时，损伤部位导致子链 DNA 合成障碍，形成空缺；此空缺诱导产生重组酶，该酶与空缺区结合，并催化子链空缺与对侧亲链进行重组交换；对侧亲链产生的空缺以互补的子链为模板，在 DNA 聚合酶和连接酶的催化下，重新修复缺口；亲链上的损伤部位继续保留或以切除修复方式加以修复。 易错修复
21、和应急反应（ SOS 反应），诱导修复是细 胞 DNA 受到严重损伤或 DNA 复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出现的一系列诱导性修复， SOS 反应诱导的修复系统包括避免差错的修复和倾向差错的修复。避免差错的修复： SOS 反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生，从而加强光复活切除修复和重组修复的能力。倾向差错的修复： SOS 反应还能诱导产生缺乏校对动能的 DNA 聚合酶，它能在 DNA 损伤部位进行复制而避免了死亡，可是却带来了高的突变率。 第三章 一、填空题 1、转录的底物是四种 NTP ，原核生物 RNA 聚合酶可受 利福 霉素 抑制，后者与该酶的 亚
22、基结合。 - 5 - 2、真核生物的三类 RNA 聚合酶对 -鹅膏蕈碱的敏感度不同， RNA 聚合酶 最敏感， RNA 聚合酶 不敏感， RNA 聚合酶 具有种属特异性。 3、通常原核生物的终止子在终止点之前均有一个 富含 GC 碱基的二重对称区 ，其产生的 RNA 可形成 发夹式结构 。 4、 DNA 结构基因中存在被转录也被翻译的序列称为 外显子 ，被转录但是不被翻译的序列称为 内含子 。 5、真核生物的 mRNA 加工过程中 ,5端加上 帽子 ，在 3端加上 poly(A) ，后者由 催化。如果被转录基因是不连续的，那么， 一定要被切除，并通过 过程将 连接在一起。 6、 10 位的 5
23、 -TATAATG-3 区和 35 位的 5 -TTGACA-3 区是 RNA 聚合酶与启动子的结合位点，能与因子相互识别而具有很高的亲和力。 7、决定基因转录基础频率的 DNA 元件是 启动子 ，它是 RNA聚合酶 的结合位点。 8、原核生物 RNA 聚合酶核心酶由 2 个 a 亚基、一 个亚基、一个亚基和一个亚基 组成，全酶由 2 个 a 亚基、一个亚基、一个亚基、一个亚基和一个亚基 组成。 二、选择题 1、下列有关 TATA 盒的叙述 ,哪个是正确的 :（ BB ） A.它位于第一个结构基因处 B.它和 RNA 聚合酶结合 C.它编码阻遏蛋白 D.它和反密码子结合 2. 转录需要的原料是
24、 : ( D) A. dNTP B. dNDP C. dNMP D. NTP E . NMP 3、 DNA 模板链为 5 -ATTCAG-3 , 其转录产物是 : ( D ) A. 5 -GACTTA-3 B. 5 -CTGAAT-3 C. 5 -UAAGUC-3 D. 5 -CUGAAU-3 4、 DNA 复制和转录过程有许多相同点 ,下列描述哪项是错误的 ? ( DD ) A.转录以 DNA 一条链为模板 ,而以 DNA 两条链为模板进行复制 B. 在这两个过程中合成均为 5-3方向 C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物 D. 两过程均需 RNA 引物 5、下列 哪种 RNA 的剪切需
25、要剪切体参与（ AA）。 A：真核细胞 mRNA B：线粒体 mRNA C： rRNA D： tRNA 6、参与转录终止的因素是（ DD）。 A： 因子 B：因子 C：转录产物 3端发夹结构 D：因子或转录产物 3端发夹结构 7、常见内含子的剪切位点具有的特征（ AA ）。 A： 5 -GU, 3 -AG B： 5 -AG, 3 -GU C： 5 -GA, 3 -UG D： 5 -UG, 3 -GA 8、真核生物中，存在于核仁中的 RNA 聚合酶是（ A ） 。 A： RNA 聚合酶 B： RNA 聚合酶 C： RNA 聚合酶 D： RNA 聚合酶 9、下面那一项不属于原核生物 mRNA 的特
26、征（ CC ） A：半衰期短 B：存在多顺反子的形式 C： 5端有帽子结构 D： 3端没有或只有较短的多聚（ A）结构 10、真核细胞中的 mRNA 帽子结构是（ AA ） A. 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸 B. 7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸 C. 7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸 D. 7-甲基胞嘧啶核苷三磷酸 12、下面哪一项是对 三元转录复合物的正确描述（ B ） （ A）因子、核心酶和双链 DNA 在启动子形成的复合物 （ B）全酶、模板 DNA 和新生 RNA 形成的复合物 （ C）三个全酶在转录起始点形成的复合物 - 6 - （ D）因子、核心酶和促旋酶形成的复合物 三、名词解释 CAAT盒 :
27、真核生物转录起始位点上游的极端保守 DNA 序列，被一组转录因子识别，调控转录的起始频率 TATA 盒： 真核生物 RNA 聚合酶转录起始位点上游大约 25 核苷酸处的富含 AT 的保守区，其功能涉及 RNA聚合酶转录的正确起始。 内含子： 在原始转录物中通过 RNA 剪接反应而被去除的 RNA 序列或基因中与这种 RNA 序列相对应的 DNA 序列。 外显子 ：在原始转录物中通过 RNA 剪接反应将内含子去除后而保留下来的 RNA 序列或基因中与这种 RNA 序列相对应的 DNA 序列 启动子： DNA 分子上结合 RNA 聚合酶并形成转录起始复合物的区域，通常位于 5上游区域。在多数情况下
28、还包括促进转录起始的调节蛋白的结合位点。 RNA 编辑 ：是某些 RNA，特别是 mRNA 的一种加工方式，通过核苷酸的替换、插入或删除初生转录物特定部位的碱基而改变其中的核苷酸序列，它导致了 DNA 所编码的遗传信息的改变，因为经过 编辑的 mRNA 序列发生了不同于模板 DNA 的变化。 因子： 原核生物 RNA 聚合酶的一个亚基，是转录起始所必需的因子，主要影响 RNA 聚合酶对转录起始位点的正确选择。 四、问答题 1、 简述真核细胞与原核细胞基因的不同结构特征，阐明由此造成的不同转录后加工过程。 答：真核生物的基因结构由单顺反子构成，具有内含子和较多的重复序列。转录和翻译分别在细胞质和
29、细胞核中进行。原核生物的基因结构是由多顺反子组成，无内含子，重复序列较少。因此真核生物进行转录后的加工需要在 mRNA5端加帽子和 3端加 poly（ A）尾巴，以保持 mRNA 的稳定性。同时，还要进行 RNA的剪接和修饰以切除内含子。而原核生物的多顺反子多形成一个操纵子，完成各项功能。其转录和翻译是紧密连接的，不需要进行加尾和加冒的过程，由于没有内含子，也无需剪接步骤。 2、试比较真核生物 RNA 聚合酶识别的启动子与原核生物 RNA 聚合酶所识别的启动子的结构特点，各结构单元的功能是什么？ 答： 启动子是 RNA 聚合酶特异结合和转录起始所需的保守序列。在这段序列内，有一些对于启动子功能
30、很关键的保守短序列。 原核生物启动子的结构特点：启动区长约 40bp， -10 序列是几乎所有的启动子 都含有的一个 6bp 的序列，该六聚体通常位于转录起点上游 10bp 处，共有 -10 序列是 TATAAT，通常称为 Pribnow 框，是 RNA 聚合酶的紧密结合位点。 -35 序列是另一个在大多数启动子中都可以找到的 6bp 序列，该六聚体一般位于转录起始点上游 35bp 处，共有 -35 序列 TTGACA，是 RNA 聚合酶对启动子的识别有关序列，对转录起始频率影响很大。 真核生物启动子的结构特点：真核生物启动子位于转录起始点上游 -25-30bp 处的共同序列 TATAAA，也
31、称为 TATA 区（ Hogness 框），相当于原核生物的 -10 序列的 功能；在起始位点上游 -70-80bp 处还有另一段共同序列 CCAAT，这是与原核生物 -35bp 区的序列相对应，称为 CAAT 区（ CAAT 框）； 比较原核与真核生物转录起始点上游区的结构，发现：原核基因启动区范围较小，一般情况下 ， TATAAT（ Pribnow 区）的中心位于 -10-7，上游 -70-10 区为正调控因子结合序列， -20+1 区为负调控因子结合序列。真核基因的调控范围较大， TATAA/TA 区位于 -30-20，而 -110-40 区为上游激活区。原核生物基因启动子上游只有 TT
32、GACA 区（ -40-30）作为 RNA 聚合酶的主要结合位点，参与转录调控。真核基因除了含有与之相对应的 CAAT 区之外，大多数基因还拥有 GC 区和増强子区。原核生物 RNA 聚合酶不需要大量多肽参与，一种 RNA 聚合酶能识别不同的结构基因。 3、比较 DNA复制与转录的异同点。 - 7 - 答：相同点：都以 DNA 链作为模板，合成的方向均为 5 3，聚合反应均遵循碱基配对原则，通过核苷酸之间形成的 3 ,5 -磷酸二酯键使核苷酸链延长。 不同点： 复制 转录 模板 两条链均被复制 模板链转录（不对称转录） 原料 dNTP NTP 酶 DNA 聚 合酶 RNA 聚合酶 产物 子代双
33、链 DNA（半保留复制） mRNA、 tRNA、 rRNA 配对 A-T;G-C A-U;G-C;T-A 引物 RNA 引物 无 第四章 一、填空题 1、遗传密码的 是由于 mRNA 上的密码子与 tRNA 上的反密码子不一定严格配对。 2、核糖体上可区分出五个功能活性位点，其中 A 位点主要在 50S 亚基 上，而 P 位点主要在 50S亚基 上。 3、至少含有 42 个核苷酸的 mRNA（不包括上游的非编码序列）才 能编码含有 13 个氨基酸的多肽。 4、 tRNA 的二级结构为 三叶草 形，三级结构为 倒 L 形。 5、原核生物蛋白质合成的起始 tRNA 是 甲酰甲硫氨酰 -tRNA 携
34、带的氨基酸是 甲酰甲硫氨酸 ，而真核生物蛋白质合成的起始 tRNA 是 甲硫氨酰 -tRNA ，它携带的氨基酸是 甲硫氨酸 。 6、真核生物中 rRNA 包括 18SrRNA ， 28SrRNA ， 5.8SrRNA ， 5SrRNA 。 7、各类核糖核酸中，稀有碱基含量比例（ %）最高的是 。 8、新生肽链每增加一个氨 基酸单位都要经过 进位 ， 肽键形成 和 移位 三步反应。 9、与 mRNA 密码子 ACG 相对应的 tRNA 的反密码子是 CGU ， tRNA 的反密码子为 UGC，它识别的密码子为 GCA 。 10、一种氨基酸最多可以有 6 个密码子，一个密码子最多决定 1 种氨基酸
35、。 11、多肽合成的起始密码子是 AUG ，而 UAA ， UAG 和 UGA 是终止密码子。 12、 tRNA 分子有 氨基酸臂 ， T C 环 ， 反密码子环 、 可变环 和 尿嘧啶环 等五个主要结构。 - 8 - 二、选择题 1 多数氨基酸都有两个以上密码子，下列哪组氨基酸只有一个密码子？（ CD ） A苏氨酸、甘氨酸 B脯氨酸、精氨酸 C丝氨酸、亮氨酸 D色氨酸、甲硫氨酸 E天冬氨酸和天冬酰胺 2 tRNA 分子上结合氨基酸的序列是（ B ） A CAA-3 B CCA-3 C AAC-3 D ACA-3 E AAC-3 3遗传密码（ C） A 20 种氨基酸共有 64 个密码子 B碱
36、基缺失、插入可致框移突变 C AUG 是起始 密码 D UUU 是终止密码 E一个氨基酸可有多达 6 个密码子 4、 tRNA 能够成为氨基酸的转运体、是因为其分子上有 (A) A -CCA-OH 3末端 B 3 个核苷酸为一组的结构 C稀有碱基 D反密码环 E假腺嘌吟环 5、蛋白质生物合成中的终止密码是（ A）。 （ A） UAA （ B） UAU （ C） UAC （ D） UAG （ E） UGA 6、 Shine-Dalgarno 顺序 (SD-顺序 )是指 :（ AA） A.在 mRNA 分子的起始码上游 8-13 个核苷酸处的顺序 B.在 DNA 分子上转录起 始点前 8-13 个
37、核苷酸处的顺序 C.16srRNA3端富含嘧啶的互补顺序 D.启动基因的顺序特征 7、“同工 tRNA”是：（ A） (A)识别同义 mRNA 密码子 (具有第三碱基简并性 )的多个 tRNA (B)识别相同密码子的多个 tRNA (C)代表相同氨基酸的多个 tRNA (D)由相同的氨酰 tRNA 合成酶识别的多个 tRNA 8、反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性 (摇摆 )。（ A ） （ A）第一个 (B)第二个 (C)第二个 (D) 第一个与第二个 9、与 mRNA 的 GCU 密码子对应的 tRNA 的反密码子是（ B ） （ A） CGA （ B） IGC （ C） CIG （
38、 D） CGI 10、真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是（ C） （ A）翻译与转录偶联进行 （ B）模板都是多顺反子 （ C） 都需要 GTP （ D）甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸 三、名词解释 单顺反子： 只编码一条多肽链的 mRNA。 多顺反子： 编码多条多肽链的顺反子 简并密码子： 三联体第三位碱基不同而编码同一种氨基酸的遗传密码 SD 序列： 原核生物 mRNA 起始密码子上游 813 个核甘酸处的一段富含嘌呤的保守序列，该序列由 Shine和 Dalgarno 发现而得名，其可与核糖体小亚基中的 16SrRNA的 3端序列进行碱基配对，它的功能是相对于起始密码子而正确定位核糖体。 开放
39、阅读框（ ORF）： 是指 DNA 或 RNA 分子中一组连续的不重叠的密码子（不包含终止密码子），观察 DNA 序列，可以辨认起始于 ATG，终止于 TGA、 TAA、或 TAG 的连续的密码子区域，是有可能编码蛋白质的 DNA 序列。 四、问答题 1、原核生物蛋白质的合成可分为哪些阶段？简述各阶段的主要事件。 答：原核生物的蛋白质合成分为四个阶段：氨基酸的活化、肽链合成的起始、延伸和终止。 氨基酸的活 化：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量，才能参与蛋白质的合成，活化反应由氨酰 tRNA- 9 - 合成酶催化，最终氨基酸连接在 tRNA3端 AMP 的 3 -OH 上，合成氨酰 -tRNA
40、。 肽链合成的起始：首先 IF1 和 IF3 与 30S 亚基结合，以阻止大亚基的结合；接着， IF2 和 GTP 与小亚基结合，以利于随后的起始 tRNA 的结合；形成的小亚基复合物经由核糖体结合点附着在 mRNA 上，起始 tRNA和 AUG 起始密码子配对并释放 IF3，并形成 30S 起始复合物。大亚基与 30S 起始复合物结合，替换 IF1 和IF2+GDP，形成 70S 起始复合物 。这样在 mRNA 正确部位组装成完整的核糖体。 肽链的延伸：延伸分三步进行，进位：负载 tRNA 与 EF-Tu 和 GTP 形成的复合物被运送至核糖体， GTP 水解， EF-Tu GDP 释放出来
41、，在 EF-Ts 和 GTP 的作用下， EF-Tu GDP 可以再次利用。转肽：肽酰转移酶将相邻的两个氨基酸相连形成肽键，该过程不需要能量的输入。移位：移位酶（ EF-G）利用 GTP 水解释放的能量，使核糖体沿 mRNA 移动一个密码子，释放出空载的 tRNA 并将新生肽链运至 P 位点。 肽链的终止与释放：释放因子（ RF1 或 RP2）识别终止密码子，并在 RP3 的作用下，促使肽酰转移酶在肽链上加上一个水分子并释放肽链。核糖体释放因子有助于核糖体亚基从 mRNA 上解离。 2、简述遗传密码破译的方法 。 答：以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成 制备大肠杆菌的无
42、细菌合成体系，在含有 DNA、 mRNA、 tRNA、核糖体、 AA-tRNA 合成酶及其他酶类的抽提物中加入 DNase，降解体系中的 DNA，耗尽 mRNA 时，体系中的蛋白质合成停止，当补充外源 mRNA 或人工合成的各种均聚物或共聚物作为模板以及 ATP、 GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生 肽链的氨基酸顺序由外加的模板所决定。因此，分析比较加入的模板和合成的肽链即可推知编码某些氨基酸的密码。 核糖体结合技术 以人工合成的三核甘酸如 UUU、 UCU、 UGU 等为模板、在含核糖体、 AA-tRNA 的适当离子强度的反应液中保温，然后使反应液通过硝酸纤维素滤膜。游离的 AA-
43、tRNA 因相对分子质量小而能自由通过滤膜，加入三核苷酸模板可以促使其对应的 AA-tRNA 结合到核糖体上，体积超过膜上的微孔而被滞留，这样就能把已结合到核糖体的 AA-tRNA 与未结合的 AA-tRNA 分开。 第五章 名词解释 蛋白质工程： 应用重组 DNA 技术设计并构建具有新性质的蛋白质或酶的实验技术。该技术是将随机性单个部位改变引入结构基因以生成突变体基因，再将其与启动子偶联以指导发生特定改变的蛋白质的合成，随后分析蛋白质的结构和功能特征并与预期的特征进行比较。蛋白质的设计可辅以计算机绘图技术及其他先进的分子模式技术。 分子克隆： 指遗传信息的分子操作和精密施工，即按人们的需求，
44、将一种生物的基因或化学合成的基因与适合的载体 DNA 分子连接，构成重组 DNA 分子，然后将其导入受体细胞中复制扩增，从而获得该基因片段的大量拷贝。 酵母双杂交系 统： 以酵母的遗传分析为基础研究反式作用因子之间相互作用对真核基因转录调控影响的实验系统，用于鉴定蛋白质之间的相互作用。 聚合酶链式反应 ： 在体外将 DNA 靶序列的拷贝数大量扩增的技术，其基本过程包括变性、复性以及 DNA聚合酶指导下的链的延伸三个阶段的反复循环。 RACE技术： 在已知 cDNA 序列的基础上克隆 5端或 3端缺失序列的技术，用于对 RNA分子末端作图 原位杂交技术（ ISH）： 用标记核酸探针，经放射自显影
45、或非放射检测体系，在组织、细胞、间期核及染色- 10 - 体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段，通常可分为 RNA 原位杂交和染色体原位杂交两大类。 第七章 一、填空题 1基因表达调控主要表现在两个方面： 转录水平的调控 和 转录后水平的调控 。其中，后者又包括mRNA 加工成熟水平上的调控和 翻译水平上的调控 。 2. 不同生物使用不同的信号来指挥基因调控。原核生物中， 营 养 状 况 和 环境因素 对 基 因 表 达 起 着 举 足 轻 重 的 影 响 。 在 高 等 真 核 生 物 中 ， _ 激 素 水 平 _ 和 _发育阶段 _是基因表达调控的最主要手段。 3.原核生物的基因调控主要发生在转录水平上，根据调控机制的不同可分为 _负转录调控
