对高压冷冻技术的应用探究1高压冷冻高压冷冻是在2.1108Pa压力下对生物样品进行冷冻固定,在此压力下,允许样品在一定的冷冻速度范围内得以充分地冷冻,而且冷冻样品的厚度可达600m19。冷冻过程实际上是使细胞内的水由液体转变为固体的过程。在此过程中,水的体积增大,而2.1108Pa的高压明显地抑制这一膨胀过程,使得通过改变水的物理特性从而抑制冰晶的形成。这一变化减少了由于水结冰而产生的热量,实际上也就减少了单位时间内所需冷却的热量,因此也就降低了获得满意冷冻效果所需的冷冻速度21。样品有效冷冻厚度的增加,使得冷冻技术为生物结构的研究创造了更多的机会。2高压冷冻仪细胞暴露在高压下自然会受到损伤23,而且压力越大,暴露时间越长,所受的损伤越严重19。因此要防止压力对样品的损伤,必须设计出合理的仪器,使得细胞在冷冻之前能经受瞬间的高压。Moor及其同事经过20余年的努力已发展出适用于生物组织和细胞学研究用的高压冷冻仪BalzerHPM010(BalzersCorporation,Hudson,NH)19,20,25。高压冷冻仪