分子病理学方法1.探讨疾病发生分子机制的基本思路 探讨基因结构的改变与疾病发生的关系 探讨基因表达的改变与疾病发生的关系蛋白质水平核酸水平 寻找疾病相关基因2.分子克隆及分子探针制作技术 限制性内切酶 质粒载体 分子克隆的步骤 分子探针的制作 常用标记物及显示系统核酸酶 核酸外切酶 核酸内切酶限制性内切酶 限制性内切酶是核酸酶的一种,核酸酶通常是指能够水解磷酸二脂键裂解DNA或RNA的酶。 有些核酸酶对DNA的裂解是非特异的,也就是说它们在核酸分子内的切割是随机的。 而另一些酶却能识别DNA分子的某些特定序列对DNA分子有选择的切割,这种酶就称为限制性内切核酸酶(限制酶)。回文结构 回文结构:双链DNA中含有的结构相同、方向相反的序列。 例如:5GGTACC3 3CCATGG5限制性内切酶(Eco R )GAATTCCTTAAG5NNNNG AATT CNNNN33NNNNC TTAA GNNNN5 5NNNNG pAATTCNNNN33NNNNCTTAAp GNNNN5限制性内切酶(Hae )GGCCCCGG5NNNNNGG CCNNNNN33NNNNNCC GGNNNNN55NNN