实验8-污水中噬菌体的分离与效价测定课件.ppt

上传人:晟*** 文档编号:14410599 上传时间:2022-10-16 格式:PPT 页数:21 大小:4.67MB
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实验七污水中噬菌体的分离、纯化与效价测定实验目的掌握噬菌体分离的基本原理和方法学会观察噬菌斑了解噬菌体纯化、效价测定方法基本原理噬菌体是专性寄生物,必需寄生细菌才能繁殖,伴随细菌的分布而分布,只要有细菌的地方,就有噬菌体噬菌体颗粒可以在环境中独立存活,但不能繁殖噬菌体对宿主的寄生通常具有特异性温和噬菌体和烈性噬菌体烈性噬菌体在液体中,可以使浑浊的菌液变为澄清烈性噬菌体在固体琼脂平板,可以形成透明的噬菌斑利用噬菌体斑的特征可以分离、纯化、效价滴定噬菌斑的形成 在固体琼脂培养基上,噬菌体感染细菌后,在宿主细胞内进行核酸和蛋白质的生物合成,最后装配成噬菌体完整的颗粒,通过裂解宿主细胞释放出来,使感染的细菌不能生长,从而形成肉眼可以观察到的透明或浑浊的空斑,称为噬菌斑。噬菌体的初次分离将可能含有宿主菌的材料在液体培养基中过夜培养,然后将液体培养液过滤除菌,滤液备用。将宿主菌涂布在平板表面,自然干燥。取滤液10l 滴在平板上,过夜培养,如果有针对该宿主菌的噬菌体,则可以看到透亮的抑菌圈。问题如果采用这种方法,看不到抑菌圈,可以说明的是哪些情况?如何进行噬菌体的纯化挑取单一清晰可见的单个噬菌斑,接

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