基因克隆技术课件.ppt

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资源描述

2008.11.28基因克隆的技术方法探讨 基因工程所用到的酶系(一)限制性核酸内切酶(restriction endonuclease )能识别双链DNA 分子的特定序列,并在识别位点或其附近切割DNA 的一类内切酶。简称为限制性酶(restrition enzyme )。 取微生物属名的第一个字母和种名的头两个字母组成三个斜体字母加以表示,遇有株名,再加在后面。如果同一菌株先后发现几个不同的酶,则用罗马数字加以表示。EcoRI表示大肠杆菌属名第一个字母E :表示种名头两个字母 co :表示株名 R :表示该菌中第一个被分离出来的酶。I :Hind III 的识别序列:5-A A G C T T-33-T T C G A A-5 5-A A G C T T-33-T T C G A A-5切割后形成具有粘性末端(cohesive end )的DNA 片段:限制性酶一般不在识别序列的对称轴上切割,而是交错切割结果形成5 或3 单链突出的粘性末端的DNA 限制片段。二个具有互相匹配的粘性末端的DNA 片段可以通过碱基的互补及DNA 连接酶的作用而重新连接起来。HpaI 的识别序列:5 -

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