电泳技术的基本原理课件.pptx

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资源描述

带电物质在电场中向其所带电荷相反的电极移动的现象称电泳。 电泳分离生物大分子的原理: 由于混合物中各组分所带电荷性质、电荷数量以及分子量的不同,在同一电场的作用下,它们泳动的方向和速度也不同。因此,在一定时间内各组分移动的距离不同,从而达到分离和鉴定的目的。在电场中,推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。FEQ质点的前移同样要受到阻力(f )的影响,对于一个球形质点,服从Stoke定律,即:f6 r (r为质点半径,为缓冲液的粘滞系数,为质点移动速度)其他因素:缓冲液pH、离子强度I、支持介质的筛孔等。影响迁移率的因素SDS-PAGE凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳SDS-PAGE凝胶电泳基本原理基本原理分类分类连续系统;连续系统;不连续系统:不连续系统:浓缩效应浓缩效应,电荷效应电荷效应。分离分离范围范围上样缓冲上样缓冲液液常见常见问题及处理方法问题及处理方法优缺点优缺点基本原理阴离子去污剂SDS破坏蛋白质分子之间及与其它物质分子之间的非共价键,使蛋白质变性而改变其原有的构象,并同蛋白质分子充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物强还原剂巯基乙醇打开

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