细胞培养1 1一 原代培养（略）2 2二. 传 代 培 养 准备及注意事项 换 液 传 代 冻 存 复 苏 MTT3 3准备事项1. 紫外灯照射细胞室30 分钟, 风机运行10 分钟后方可进入实验室.2. 穿专用的口罩, 帽子, 拖鞋, 工作衣等.3. 带手套, 并用酒精擦拭之.4. 准备好实验必需用品.5. 超净工作台内操作前用酒精棉球擦拭台面.6. 超净工作台内操作完成后，要用酒精棉球擦拭台面, 除了酒精灯, 镊子, 试管架等物品外, 其他都要拿出工作台外.紫外灯照射30 分钟.4 4换液1. 把细胞培养瓶从培养箱中拿出, 拧紧盖子;2. 观察瓶内培养基的颜色, 是否浑浊等; 放在倒置显微镜下观察细胞生长状况。3. 放入超净工作台内, 点燃酒精灯, 拿培养瓶口在酒精灯火焰上转两圈以上, 至少三秒.4. 取下盖子, 烧瓶口; 倒掉培养基, 烧瓶口;5. 拿出PBS 液瓶子, 烧瓶口和镊子; 用镊子将塞子取出, 烧瓶口（至少10 圈）。5 56. 6. 用吸管吸取 用吸管吸取3ml 3ml 的 的PBS PBS ，打入培养瓶内。烧培养瓶口， ，打入培养瓶内。烧培养瓶口， 来回晃动 来回
