免疫印迹技术的基础-免疫反应% 免疫测定(immunoassay) 利用抗原抗体 反应来测定标本中抗原或抗体的方法 % 检测对象:具体免疫活性的物质 % 反应特性:高度的特异性和敏感性+ Western Blot原理简介+ Western Blot一般流程+ Western Blot常见问题分析内容概要 在电场的作用下将电泳分离的多肽从凝胶转移至一种固相支持体,然后用这种多肽的特异抗体来检测。Western Blot 原理 目的蛋白的表达特性分析 目的蛋白与其它蛋白的互作 目的蛋白的组织定位 目的蛋白的表达量分析Western Blot 的应用+ Western Blot原理简介+ Western Blot一般流程+ Western Blot常见问题分析内容概要Western Blot 流程l 蛋白样品的制备 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳l 转膜l 封闭l 一抗杂交l 二抗杂交l 底物显色? ? 通过水溶法或有机溶剂制备总蛋白 通过水溶法或有机溶剂制备总蛋白 水溶液提取法 水溶液提取法 针对水、稀盐、稀酸或碱溶液中的蛋白质。稀盐和缓冲系统水 针对水、稀盐、稀酸或碱溶液中的蛋白质。稀盐和缓