血红蛋白的提取分离DNA的粗提取与鉴定课件.ppt

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DNA的粗提取与鉴定1. 提取生物大分子的基本思路是,选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。提取DNA就是利用DNA与RNA、蛋白质、脂质等理化性质的差异去除杂蛋白。2. DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,因此可以选择适当盐浓度使DNA充分溶解,使杂质沉淀,或者相反以达到分离的目的。进一步分离DNA和蛋白质,可利用DNA不溶于酒精,某些蛋白质溶于酒精的原理。3. 蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA无影响;多数蛋白质不能忍受6080 的高温,而DNA在80 以上才会变性。洗涤剂能瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 4. DNA粗提取与鉴定,四个主要的实验步骤: 步骤 目的实验材料的选取鸡血细胞 DNA丰富破碎细胞 获取含DNA的滤液去除滤液中的杂质 纯化DNADNA的析出与鉴定 鉴定DNA5. 选取实验材料,原则上凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,为提高实验的成功率要选用DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血细胞、洋葱等。破碎动物细胞常用蒸馏水,用玻璃棒搅拌后收集滤液。破碎植物细胞需先用洗涤剂、食盐

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