血清γ球蛋白的分离纯化和鉴定课件.ppt

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资源描述

资料仅供参考,不当之处,请联系改正。分工合作n n 专人、固定锥形瓶,放开,不断滴加pH6.3醋酸盐缓冲液,防止气泡。n n 盐析混匀时需要两个人合作。n n 两次操作是一样的,都有动手的机会。n n 改错!(P46 页错误)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。操作n n 一、盐析 取1ml血清1ml, 取1ml饱和(NH)SO溶液缓慢滴入,边加边摇。 混匀后于室温中放置10 分钟。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。目的要求n n ( 一) 掌握分离纯化蛋白质的基本原理。n n ( 二) 了解柱层析技术。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。实验原理n n 蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。n n 不同蛋白质的分子量、溶解度及在一定条件下,带电的情况等都有所不同。利用这些性质的差别,可分离纯化各种蛋白质。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。一、粗提(盐析法)n n 盐析的定义。常用的中性盐有:硫酸铵、硫酸钠等,由于各种蛋白质分子的颗粒大小和亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样。n n 因此,调节盐的浓度可使不同的蛋白质沉淀从而达到分离的目的。资料仅供参考,

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