荧光分光光度法课件.pptx

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吸收 发射第十一章 荧光分析法1、光致发光现象:激发态电子回到低能级而伴随光的辐射11.1 概述热辐射光辐射h+基态 激发态 基态磷光荧光分子荧光原子荧光UV 荧光X-射线荧光原子 荧光光致发光的分类:光光源2荧光分析法:利用物质的荧光谱线波长和强度进行定性定量分析方法 。b选择性好;但应用不如UV广泛3特点:a灵敏度比UV高,检测限10-1010-12g/ml荧光:物质分子在激发态最低振动能级返回到基态各振动能级时所发射出的光 TLC定性、定量4应用:物质荧光光度法定性定量作为HPLC的检测器11.2 基本原理如: 电子跃迁1、分子的能级和电子能级的多重性:激发态*分子能级=电子能级+振动能级+转动能级基态11.2.1 分子荧光光谱的产生自旋量子数S: 0 0 1多重性M=2S+1: 1 1 3状态描述: 单重S 单重态S 三重态T能量: E1 ,1 E2 ,2 寿命: 10-8秒 1秒跃迁几率: 106 1单重激发态 三重激发态单重S*和三重T*激发态的比较S0V4V1V0V3V2(b)(a) (d)(b)V0V0S1*S2*V0V1V1V1V2V2V2V3V3V3V4V4V4(c

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