SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验目的n n 了解电泳实验原理n n 掌握电泳实验操作规程n n 用电泳方法测定蛋白分子量电泳是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象。电泳技术指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。电泳基本原理: COO- COO- COOH + H+ + H+ Pr Pr Pr + OH- + OH- NH2 NH3+ NH3+ PHPI PH=PI PHPI电泳用于分离物质的原理:带电颗粒在电场作用下所受的力:电场力 F=XQ 阻力 F=6当电泳达到平衡时,带电颗粒匀速运动:F= F QX=6/X=Q/6影响电泳速度的因素:n n样品本身:带电量,分子大小,形状样品本身:带电量,分子大小,形状n n电场强度:电压电场强度:电压n n缓冲液:成分,缓冲液:成分, pH pH ,离子强度,离子强度n n支持介质:电渗作用,吸附作用支持介质:电渗作用,吸附作用n n温度温度分类n n 连续电泳n n 不连续电泳n n 非变性电泳n n 变性电泳1.连续系统:缓冲液的离子成分、PH、凝胶浓度、电位梯度都相同,带电颗粒电泳时仅具有电荷效