分子生物学基础实验指导老师:肖靓分子生物学基础实验分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力,分子生物学实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;PCR基因扩增等等。 实验要求n 上课时间与纪律:严格遵守老师的安排。n 实验室内禁止饮食、勿高声谈话、随意走动。n 课前预习、课中认真操作、课后的实验报告。n 妥善保管好每组的实验器具。n 实验操作要求人人动手。n 值日制度:每天五位同学。一、质粒DNA小量制备的实验原理n 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进细胞中去进行繁殖和表达,需要运载工具,携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体(vector)。载体的设计和应用是DNA体外重组的重要条件。作为基因工程的载体必须具备下列条件n 是一个复制子,载体有复制点才能使与它结合的外源基因复制繁殖。n 载体在受体细胞中能大量增殖,只有高复制率才能使外源基因在受体细胞中大量扩增。n 载体DNA链上有1到几个限制性内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入