生科0801 黄开松 克隆基因的表达目前有5 套发展成熟的表达系统1 在大肠杆菌中表达2 在哺乳动物细胞中表达3 在酿酒酵母中表达4 在枯草芽孢杆菌中表达5 在培养的昆虫细胞中表达 在大肠杆菌中表达克隆化基因 选择合适 启动子和载体系统 1 带IPTG 诱导启动子的表达载体 例如tac trc lac 启动子 (pUC,pTZ,pSK,pGEM 等） 2 含T7 噬菌体启动子的表达载体（例如pET 系列载体） 外源基因表达受T7 噬菌体RNA 聚合酶调控，具有氨苄或者卡 那抗性，多克隆位点置于T7 噬菌体RNA 聚合酶启动子之后 3 带有& 噬菌体PL 启动子的表达载体（ pPLc 系列 pKC30 等） 受温度敏感性阻抑物cIts857 调控，低温时能抑制PL 驱动的转录，高温不能 4 用碱性磷酸酶启动子（phoA ）和信号序列 pET 系统对T7RNA 聚合酶水平和靶基因转录实行多层次调控 目标蛋白在大肠杆菌里大量表达后我们却面临着怎样高效简易收集纯化活性目的蛋白的问题 宿主蛋白酶降解 形成不溶性包涵体 无法分泌到特定的细胞区 目的蛋白无法从细胞裂解液里得到有效的分离 解决方法？
