碱变性法小量提取质粒，DNA的限制性酶切厦门大学医学院分子生物学实验教学组实验目的v 掌握碱变性法提取质粒DNA的方法。v 掌握质粒酶切鉴定原理, 学会根据目的基因和实验目的选择合适载体与限制性内切酶，设计构建体外重组分子。质粒(plasmid)v是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器（主要指线粒体和叶绿体）和细菌细胞中染色体以外的DNA分子，在基因工程中质粒常被用做基因的载体。 是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器（主要指线粒体和叶绿体）和细菌细胞中染色体以外的DNA分子，在基因工程中质粒常被用做基因的载体。分离质粒DNA的 基本步骤v培养细菌使质粒扩增；v收集和裂解细菌；v分离和纯化质粒DNA 质粒DNA的提取方法v碱变性法（碱裂解法）；v煮沸裂解法；v羟基磷灰石柱层析法；v质粒DNA释放法；v酸酚法等。 碱变性（裂解）法基本原理： 在碱性条件下（pH 12.6），染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性，质粒DNA氢键也大部分断裂，双螺旋也有部分解开，但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离，当以pH 4.8的乙酸钠将其pH调到中性
