临床PCR技术Kary B. MullisUSA, for his invention of the polymerase chain reaction (PCR) method 1930年提出了两种核酸DNA和RNA的概念1953年Watson和Crick提出了DNA双螺旋结构及其半保留复制模型。一、PCR概述一、PCR概述(一)PCR概念PCR (polymerase chain reaction)是一种在体外通过重复DNA合成,以扩增特定核苷酸序列的方法。特点高灵敏度高特异性体外进行快捷PCR的概念 核心技术是从水栖高温菌中分离到能耐高温的Taq酶,使扩增反应不需要每一个循环加一次DNA聚合酶,从而实现了自动化。 应用领域迅速扩大,PCR技术成为了分子生物学中的一项突破性技术。PCR概述2000至2013年发表论文1280748篇一、PCR概述(二)原理双链DNA 变性 退火 链延伸 (膜板) (双链分成单链) (膜板与引物杂交) (DNA合成)不断重复二、实验步骤(一)核酸提取1.DNA提取100ul浓缩液100ul血清吹打混匀12000g离心5min弃上清20ul提取液100