基因克隆的载体系统课件.ppt

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资源描述

4 基因克隆的载体系统4.1 质粒(plasmid)载体 大肠杆菌主要的天然质粒类型: F 质粒:致育因子或性因子 R 质粒:抗药性因子 Col 质粒:产生大肠杆菌素因子 基因工程中使用的质粒载体都是在天然质粒的基础上人工改造而成的。质粒载体是重组DNA研究中最常用的也是最重要的基因克隆载体。4.1.1 质粒的生物学特性4.1.1.1 质粒DNA及其构型 绝大多数质粒都是环状双链DNA分子质粒DNA的构型: SC 构型:由cccDNA呈现超螺旋而形成; OC 构型:开环DNA(ocDNA)的构型; L 构型:双链断裂而形成的线性质粒 DNA分子。(2)F质粒及起接合转移:详见遗传学相关内容4.1.1.2 质粒DNA的转移(1)质粒的类型 接合型质粒:能够自主转移的质粒。 非接合型质粒:不能自主转移的质粒。4.1.1.3 质粒DNA的迁移作用 由共存的接合型质粒引发的非接合型质粒的转移过程ColE1质粒的迁移:2个相关基因:bom:ColE1 DNA 上的特异位点,是 Mob基因产物的作 用位点;mob:其产物是 ColE1 质粒特有 的弥散产物核 酸酶,作用于 bom位点。4.1.1.

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