二、基因工程的基本程序载体质粒外源DNA片段 外源DNA插入剪切引入宿主细胞选出含有重组DNA的细胞扩增表达abbAAb第二章 基因工程中常用的工具酶第一节限制性核酸内切酶与DNA分子的体外切割第二节DNA连接酶和DNA分子的体外连接第三节其他工具酶第一节限制性核酸内切酶与DNA分子的体切割限制性核酸内切酶,是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。l 一、寄主控制的限制与修饰作用如图2-1,图2-2l 二、限制性核酸内切酶的制备方法l 三、限制性核酸内切酶分类和命名l 四、型限制性核酸内切酶的基本特性l 五、影响限制性内切酶活性的因素分类:识别和切割位点不固定,随机性。:核酸内切酶活性和甲基化活性是不分开的。:能在识别位点处切割DNA,切割位点固定。核酸内切酶活性和甲基化活性是分开的。常用。四、型限制性核酸内切酶的基本特性识 别 序 列:1.47个核苷酸组成的特定核苷酸序列2.回文结构:两个顺序相同的拷贝在DNA链上呈反向排列。EcoR 5-GAATTC-33-CTTAAG-5l经限制酶切割后的位点,DNA断裂类型1.粘性末端(1)3-