1、实践五 高锰酸钾吸收光谱曲线的绘制及含量测定一、实践目的1、掌握紫外-可见分光光度计的操作方法。2、熟悉紫外-可见分光光度计的基本构造及作用。3、会依据吸收光谱曲线确定最大吸收波长。4、会用标准曲线法测定高锰酸钾样品溶液的含量。二、实践原理高锰酸钾溶液呈紫红色，在可见光区有吸收，利用此可绘制吸收光谱曲线。通过吸收光谱曲线确定最大吸收波长，在最大吸收波长处进行含量测定。因此可以用紫外-可见分光光度法对高锰酸钾溶液进行定性和定量分析。三、实践仪器、药品和试剂1、仪器紫外-可见分光光度计；分析天平；5mL 移液管 2 支；1000mL 容量瓶；25mL容量瓶 6 个；100mL 烧杯。2、药品和试剂
2、高锰酸钾对照品(固体)；高锰酸钾样品溶液。四、实践内容(一) 配制溶液1、配制标准溶液(125mg/L)精密称取高锰酸钾对照品 0.1250g 置 100mL 烧杯中，溶解后，定量转移1000mL 容量瓶中，用纯化水稀释至标线，摇匀，即为高锰酸钾标准溶液(125mg/L)。2、配制标准系列分别精密量取 1.00、2.00、3.00、4.00 和 5.00(mL)高锰酸钾标准溶液 (125mg/L)，置于 25mL 容量瓶中，纯化水稀释至标线，摇匀。标准系列中各标准溶液的浓度依次为 5.0、10.0、15.0、20.0 和 25.0(mg/L)。3、配制样品溶液精密量取高锰酸钾样品溶液 5.00
3、ml，置 25mL 容量瓶中，纯化水稀释至标线，摇匀。即为高锰酸钾供试品溶液。(二) 绘制吸收光谱曲线以纯化水为空白溶液调节仪器基线后，测定标准系列中溶液浓度为15.0mg/L 和高锰酸钾供试品溶液的吸收光谱曲线，并从吸收光谱曲线中确定最大吸收波长，比较二者的吸收光谱曲线和最大吸收波长。(三) 测定溶液吸光度1、标准曲线的绘制在 max 处，以纯化水为空白溶液调节基线后，依次将标准系列各标准溶液放入光路中，测其吸光度 A 值。以浓度（c）为横坐标，吸光度值（A）为纵坐标，绘制标准曲线。2.高锰酸钾供试品溶液的测定在与绘制标准曲线相同的测定条件下，测定高锰酸钾供试品溶液吸光度值(A)。从标准曲线
4、中查 A 值所对应的高锰酸钾供试品溶液的溶度 c 样。(四) 岛津 UV2450 紫外-可见分光光度计的操作规程（1） 开机前检查仪器是否正常，如检查样品室内有无挡光物。（2） 分别开启紫外-可见分光光度计主机和计算机电源，从计算机桌面“UVProbe“进人操作程序。（3） 点击“连接”进人紫外-可见分光光度计自检系统，自检过程中，切勿开启样品室门，自检无误后进入主工作程序。（4） 编辑测定方法，输人所需数据。（5） 用纯化水分别清洗 2 个石英比色杯(手拿磨砂面)3 次，再用空白溶液各洗 3 次，分别装入 2/3 的空白溶液，用镜头纸将比色杯外壁溶液吸干。（6） 打开样品室门，分别将比色杯放
5、入样品池及参比池中，即置各自光路中。关好样品室门。进行零点校正。（7） 将样品池中空白溶液更换为供试品溶液，置光路中，关好样品室门、测量吸光度值或吸收光谱曲线。（8） 关闭操作程序、紫外-可见分光光度计和计算机电源。清洗比色杯。紫外可见分光光度计使用注意事项如下：（1） 检测器预热时必须等待所有指示灯变为绿色，才可进行下一步操作。（2） 放人比色杯时务必小心轻放，确保比色杯已完全进人光路中。（3） 必须扫描基线，空白溶液即未加样品的溶液，必须与样品溶液一致。（4） 扫描过程中切忌打开或试图打开样品室门。五、计算公式c 原样=c 稀释 稀释倍数六、实践结果(一) 定性分析1、高锰酸钾溶液的吸收光
6、谱曲线（1）标准系列中溶液浓度为 15.0mg/L 的吸收光谱曲线。（2）高锰酸钾供试品溶液的吸收光谱曲线。2、高锰酸钾溶液的最大吸收波长（1）标准系列中溶液浓度为 15.0mg/L 的最大吸收波长 。（2）高锰酸钾供试品溶液的最大吸收波长 。3、定性分析结论(二) 定量分析1、数据记录项目 1 2 3 4 5 供试品溶液c/(mg/L)123A平均值2、绘制标准曲线（附坐标图）3、高锰酸钾溶液浓度（1）高锰酸钾供试品溶液的浓度 。（2）高锰酸钾样品溶液的浓度 。七、思考与讨论1、高锰酸钾溶液在哪个光区范围有吸收？测定时应采用何种光源和比色杯？2、如何确定最大吸收波长？3、如何绘制标准曲线？怎样计算样品溶液的浓度？
