1、 周俊宜周俊宜基础医学院生化教研室基础医学院生化教研室DNA目目 录录PCR技术简史技术简史 PCR的原理的原理PCR的反应体系和方法的反应体系和方法PCR的的 类型和应用类型和应用PCR技术简史 DNA的复制 核酸体外扩增的设想 聚合酶链反应的发明 1971年， Khorana提出：经过 DNA变性，与合适引物杂交，用 DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆 tRNA基因。 但由于测序和引物合成的困难，以及 70年代基因工程技术的发明使克隆基因成为可能，所以， Khorana的设想被人们遗忘了 PCR技术简史 DNA的复制 核酸体外扩增的设想 聚合酶链反应的发明 1985年，美国 P
2、E-Cetus公司的 Mullis等人发明了聚合酶链反应（ PCR） 基本原理是在试管中模拟细胞内的 DNA复制 最初采用 E-coli DNA聚合酶进行 PCR， 由于该酶不耐热，使这一过程耗时，费力，且易出错 耐热 DNA聚合酶的应用使得 PCR能高效率的进行，随后 PE-Cetus公司推出了第一台 PCR自动化热循环仪 1993年， Mullis等因此项技术获诺贝尔化学奖Kary B. Mullis1989年美国年美国 Science 杂志列杂志列 PCR 为十余项重大为十余项重大科学发明之首科学发明之首 ,比喻比喻 1989年为年为 PCR爆炸年爆炸年 ,Mullis荣荣获获 1993年度诺贝尔化学奖。年度诺贝尔化学奖。生物样品生物样品DNA片段片段基因诊断基因诊断 基因治疗基因治疗 基因工程产品基因工程产品 法医学检测法医学检测 人类学研究人类学研究 基因组基因组 DNA获取特定获取特定 DNA片段片段扩增特定扩增特定DNA片段片段引物引物Mullis的构思的构思DNA聚合酶聚合酶DNA聚合酶聚合酶特定特定 DNA片段片段
