1、现 代 实 验 技 术 概 述南京医科大学儿科医学研究所 辜 楠 研 究 思 路整 体 （动物模型、 ELISA ）组 织、细 胞 （组织、细胞培养）分 子 （ RNA、 DNA、 Protein）基 因 （基因克隆）整 体 研 究动物模型 自发性动物模型（ Spontaneous Animal Models） 是指实验动物未经任何有意识的人工处置， 在自然情况下所发生的疾病。这类模型在 遗传病、代谢病、免疫缺陷病 、 内分泌疾病和肿瘤 等方面的应用正日益增多。 诱发性或实验性动物模型（ Experimental Animal Models） 是指研究者通过使用物理的、化学的和生物的致病因素作
2、用于动物，造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病时的功能、代谢或毒使动物患相应的传染病，又如用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。 是药物筛选研究工作所首选。 整 体 研 究ELISA 酶联免疫吸附测定（ Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ）原理 :抗原或抗体的 固相化 及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量呈一定的比例，由此进行 定性或定量分析 。 ELISAELISA可用于测定 抗原 ，也可用于测定 抗体 。三个必要的试剂：（ 1）固相的抗菌素原或抗体，即 “ 免疫吸附剂
3、 ” （ immunosorbent）；（ 2） 酶标记的抗原或抗体，称为 “ 结合物 ” （conjugate）（ 3） 酶反应的底物。 ELISA双抗体夹心法测抗原 双抗原夹心法测抗体组织、细胞培养培养：将取得的组织、细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上 幼体组织 （尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低 的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织 比正常组织容易培养。组织、细胞培养 组织块培养：直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。 细胞培养：一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。培养条件 完全培养基 ：由基础培养基（如 MEM） 和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成。 条件： 37度 、 5 CO2、 合适的 PH 关键： 无菌CO2培养箱
