1、仪仪 器器 分分 析析第 11章 液相色谱和高效液相色谱法 液相色谱法的主要类型 经典液相色谱 高效液相色谱111.1 液相色谱法的主要类型 液相色谱法的优点 ： (1) 应用范围广 (2)选择性高 (3) 工作温度较低 (4) 可用于制备纯样品11.1.1液 -固吸附色谱法 （ LSAC ）1 基本原理 选择性吸附分离2Xm-流动相中的溶质分子 Xs-吸附剂表面上的溶质分子Mm-流动相中的溶剂相分子Ms-吸附剂上被吸附的流动相n-被溶质分子取代的流动相分子的数目选择性吸附分离Ka 大 组 分在吸附 剂 上保留 强 ， 难 于洗脱Ka 小 组 分在吸附 剂 上保留弱，易于洗脱吸附平衡常数32
2、固定相 极性固定相酸性吸附剂：硅胶和硅酸镁， 适于分离碱性物质碱性吸附剂：氧化铝、氧化镁 适于分离酸性溶质非极性固定相高聚物微球、聚合物包覆固定相、石墨化碳黑43 流动相定义： 溶剂分子在单位吸附剂表面的吸附自由能，表示溶剂分子对固定相的亲和程度。特点： 值越大，溶剂的吸附越强，其洗脱能力就越强。将溶剂按值的大小顺序排列起来，则构成溶剂的洗脱系列应用： 组分保留值小 -弱极性溶剂（值小）； 组分保留值大 -强极性溶剂（值大）。复杂混合物 -二元或三元混合溶剂体系溶剂强度参数511.1.2 液 -液分配色谱法 （ LLPC)1 基本原理 流或动相和固定相均为 液体 ，作为固定相的液体是涂在很细的
3、惰性载体上。 正相分配色谱： 流动相的极性小于固定相的极性，适用于极性化合物的分离反相分配色谱： 流动相的极性大于固定相的极性，适用于非极性化合物的分离。2 固定相 极性固定相： , 氧二丙腈（强极性）、聚乙二醇（中等极性）非极性固定相： 角鲨烷63 流动相 基本要求： 不与固定相互溶，与固定相的极性差别显著注意事项： 预处理、流速、柱温、进样量11.1.3 化学键合相分配色谱法 （ CBPC) )将功能基团通过化学反应键合至载体表面，分为正相键合相色谱法和 反向键合相色谱法（疏溶剂理论 ） 711.1.4 尺寸排阻色谱法 （ LLPC)按 分子大小 顺序进行分离，固定相为化学惰性多孔物质及凝
4、胶，它类似于分子筛。 811.2 经典液相色谱法 11.2.1液 -固吸附柱色谱法 （ LSAC ）1 吸附剂 硅胶： 硅氧交联结构，含硅醇基 (-Si-OH)的多孔、微酸性微粒，性能与含水量密切相关氧化铝： 酸性氧化铝 (pH4 5)中性氧化铝 (pH7.5）碱性氧化铝 (pH9 10)聚酰胺大孔树脂 2 色谱条件的选择 被分离组分的结构 吸附剂和流动相的选择911.2.2薄层色谱法 （ TLC ）将固定相均匀涂铺在具有光洁表面的玻璃、塑料或金属板上形成薄层板，将一定量混合样品溶液置于薄层板一端确定位置 (称为点样 )，在密闭容器中用适当的溶剂 (习惯称为展开剂 )展开后，根据组分在板上的位置和浓度进行分析的方法 2 技术参数 1） 比移值 (Rf)、相对比移值 (Rr) 1 定义L-待测组分的迁移距离L0 -展开剂的迁移距离 Rf=0 组分留在原点Rf=1 组分随溶剂前沿一起移动 原点1210
