SMCC-结构反应解释.docx

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资源描述

8.3ASMCC是一类含有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯和马来酰亚胺的双功能偶联剂可以将分别含有巯基和氨基的化合物键接在一起。NHS活性酯与伯胺在PH7-9的环境形成酰胺键。马来酰胺与巯基在的环境下形成稳定的硫醚键。在水溶液中,NHS活性酯的水解是(与氨基的反应)个竞争反应。马来酰胺比NHS稳定,但是在PH大于时,马来酰胺会慢慢水解,失去与巯基反应的特异性。因而,在使用SMCC时通常是在的环境下进行,并且先让NHS发生反应。SMCC结构里的环己烷环可以降低马来酰胺的水解速率。这使得蛋白质在用SMCC修饰之后可以冻干存放一段时间。很多蛋白质都选用该试剂来进行马来酰亚胺修饰。用SMCC来制备抗体-酶或者半抗原作载体的蛋白质,经常采用两步合成法。首先,含有氨基的蛋白质与几倍的偶联剂反应,反应结束后通过脱盐柱或者透析的方法除掉没有反应玩的SMCC。然后,再与含有巯基的蛋白质反应。在实际操作中要注意的是,SMCC怕潮湿,存放时要和干燥剂一起存放。并且使用中从冰箱拿出来时要先在室外放置一段时间平衡温度,以免立

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