试验9双向琼脂扩散试验.docx

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实验9双向琼脂扩散试验目的了解双向琼脂免疫扩散试验的原理和操作过程。原理将可溶性抗原和抗体分别加到琼脂板上相应的小孔中,使两者各自向四周扩散,如抗原与抗体相对应,两者相遇即发生特异性结合,并在比例适合处形成白色沉淀线。如果所加抗原和抗体标本中分别含有若干与血清学反应无关的抗原抗体,则因各种抗原的扩散系数和各对抗原抗体间的最适比例不同,以及抗原抗体复合物所形成的沉淀线具有选择性渗透屏障作用,扩散后可以形成若干条沉淀线,一条沉淀线代表一对抗原抗体。因此,通过双向免疫扩散试验,可用已知抗体(或抗原)检测未知抗原(抗体),可鉴定抗原性物质性或免疫血清的浓度、纯度及比较抗原之间的异同点。主要用于分析抗原或抗体成分定性鉴定;抗原、抗体的纯度以及抗体效价的测定。本实验以检测血清甲胎蛋白(AFP)为例。抗124完全不一致抗1、2部分一致材料1. 1.2%生理盐水琼脂。2. 待检血清、肝癌病人AFP阳性血清(或脐带血)。3. AFP诊断血清(抗AFP抗体)。4. 载玻片、琼脂板打孔器、微量加样器、吸管等。方法1. 琼

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