杆状病毒表达系统疫苗实验体液免疫与细胞免疫的检测&杆状病毒表达系统昆虫细胞的培养重组pFastBac 质粒的构建重组Bacmid 的产生与鉴定获得重组杆状病毒蛋白表达& 病毒扩大OverviewBac-to-Bac Baculovirus Expression System能快速并有效的获得重组杆状病毒,其重组是基于供体质粒表达盒与杆状病毒穿梭载体Bacmid间发生位点特异性转座。供体质粒pFastBac:靶基因位于杆状病毒特异启动子下游DH10Bac:杆状病毒穿梭载体Bacmid + 辅助质粒Bac-to-Bac 表达系统的组成和工作原理Bac-to-Bac 表达系统的组成和工作原理Expermiantal outlineInsect Cell Lines:Sf9 or Sf21 cells主要用于转染,空斑实验和滴度测定High Five cells or Mimic Sf9 cells转染效率低,主要用于蛋白表达 Graces Insect Medium with L-glutamine and supplemented with(pH 6.5): 3330 mg/L lacta