SRY基因的检测 目的要求掌握PCR反应的基本原理掌握性别决定的分子机制掌握用PCR扩增检测性别的方法掌握用PCR扩增检测性别方法的应用原理n1聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)的基本原理是,通过热变性使目的DNA(模板DNA)双链解开;通过退火将引物复性结合到它们的互补位置;通过DNA聚合酶延长引物,反复循环体外扩增出大量一对引物之间的DNA片段。 n聚 合 酶 链 反 应Polymerase Chain Reaction(PCR)一种可以将目的微量的DNA片断扩增100万倍以上的技术PCR 可以把 指定的基因片段 数量放大百万倍染色体Mullis (1993)PCR基本工作原理n以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板3和5端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制延模板链延伸直至完成新的DNA合成。n重复这一过程,可使目的DNA片段得以扩增。 PCR体系基本组成成分l含Mg2+的缓冲液ldNTPsl耐热DNA聚合酶lTagDNA聚合酶l特异性引物l一对分别与待扩增DNA序列两端互补的寡核苷酸片段。l模板D