人民医院基因扩增实验室解脲脲原体核酸定量检测标准操作程序1 项目名称解脲脲原体核酸定量检测2 检验方法名称TaqMan荧光定量检测3 方法学原理用一对解脲脲原体特异性引物和一条解脲脲原体特异性荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个荧光报告基团(R)和一个荧光淬灭基团(Q)。探针完整时,R基团发射的荧光信号被Q基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解,使R荧光基团和Q荧光基团分离,Q基团对R基团的抑制吸收作用消失,荧光监测系统就可接收到R基团的荧光信号。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成。被切割产生的荧光分子数与PCR产物的数量成比例,这样就实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。因此根据PCR反应液的荧光强度即可计算出初始模板的数量。4 标本要求4.1 适用标本类型:生殖泌尿道分泌物等。4.2 标本采集(泌尿生殖道分泌物)a ) 男性用细小棉拭子伸入尿道约24 厘米,捻动拭子采集分泌物,将棉拭子置入无菌玻璃管,密闭送检(采集分泌物前2小时禁小便)a ) 女性生