医院细胞遗传室实体瘤细胞培养及染色体制备作业指导.doc

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医院细胞遗传室实体瘤细胞培养及染色体制备作业指导书1目的规范实体瘤细胞培养与染色体制备过程,为临床实体瘤细胞染色体核型分析可靠性提供质量保证。2测定方法CO2培养/手工收获3测定原理 患者外周血培养细胞主要说明全身染色体状况,而不能说明肿瘤标本的染色体改变,因此通过对实体瘤细胞培养可获得大量的肿瘤细胞,再用秋水仙素处理就可获得大量中期分裂相的细胞,制片后可以清楚地对染色体进行观察。4性能特征经G显带处理后可见300-550条显带。5仪器与耗材酒精灯,烧杯,天平,离心机,恒温培养箱,冰盒,载玻片,玻片盒,光学显微镜,灭菌注射器(5ml),离心管,无菌吸管,量筒,培养瓶,试剂瓶,眼科镊,眼科剪,牙科探针,一次性平皿等。6试剂6.1 100ml DMEM含10%血清培养基6.2 RPMI-1640含10%血清培养基6.3秋水仙素浓度:20g/ml6.4低渗液:0.075mol/L的KCl溶液6.5卡诺固定液6.5 0.25% EDTA-trypsin6.7生理盐水6.8 胶原酶1mg / 1mlDME

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