1、 目 的 与 要 求 1 学 习 直 接 测 定 家 兔 动 脉 血 压 的 急 性 实 验 的 方 法2 观 察 神 经 ,体 液 因 素 对 心 血 管 活 动 的 影 响基 本 原 理 在 正 常 人 体 内 ,任 何 高 等 动 物 的 动 脉 血 压 时 相 对 稳 定 的 .这 种 相 对 稳 定 是 通 过 神 经和 体 液 调 节 来 实 现 的 ,其 中 以 静 动 脉 窦 -主 动 脉 弓 压 力 感 受 性 反 射 最 为 重 要 .此 反射 即 可 使 升 高 的 血 压 下 降 ,又 可 使 降 低 血 压 升 高 ,故 有 血 压 缓 冲 反 射 之 称 .家 兔
2、的主 动 脉 神 经 在 解 剖 上 独 成 一 支 ,易 于 分 离 与 观 察 起 作 用本 实 验 是 应 用 液 导 系 统 直 接 测 定 动 脉 血 压 ,即 由 动 脉 插 管 与 压 力 传 感 器 连 通 ,其内 充 满 抗 凝 液 体 ,构 成 液 导 系 统 ,将 动 脉 插 管 插 入 动 脉 ,动 脉 内 的 压 力 及 其 变 化 ,可 通 过 封 闭 的 液 导 系 统 传 导 压 力 感 受 器 ,由 计 算 机 采 集 系 统 记 录 下 来动 物 与 器 材 家 兔 ,手 术 台 , 常 用 手 术 器 械 , 止 血 钳 ,眼 科 剪 ,支 架 ,双 凹
3、管 , 气 管 插 管 ,动 脉插 管 ,三 道 管 , 动 脉 夹 ,计 算 机 采 集 系 统 ,压 力 传 感 器 ,保 护 电 极 ,照 明 灯 ,纱 布 ,棉 球 ,丝 线 ,注 射 器 (1ml,5ml,20ml),生 理 盐 水 ,4%柠 檬 酸 钠 ,20%-25%氨 基 甲 酸 已酯 ,肝 素 (200U/ml),肾 上 腺 素 (1:5000),已 酰 胆 碱 (1:10000)【 方 法 与 步 骤 】1、 实 验 仪 器 的 准 备打 开 计 算 机 采 集 系 统 ， 接 通 压 力 传 感 器 。 从 显 示 器 的 “实 验 项 目 ”中 找 出 “循环 实 验
4、”的 “家 兔 血 压 的 调 节 ”条 ， 使 显 示 器 显 示 压 力 读 数 。2、 连 通 液 导 系 统 并 制 压将 压 力 传 感 器 的 下 方 支 管 ， 通 过 输 液 管 连 接 三 通 管 ， 再 连 接 动 脉 插 管 。 上 侧 管 供 制压 时 排 除 管 内 空 气 使 用 。 先 用 装 有 20ml 4%柠 檬 酸 钠 的 注 射 器 ， 通 过 三 通 管 向 连接 动 脉 插 管 的 输 液 管 内 推 注 ， 使 之 充 满 液 体 （ 不 要 使 动 脉 插 管 高 过 压 力 传 感 器 的 上方 支 管 ） 后 ， 再 用 止 血 钳 夹 住
5、动 脉 插 管 端 的 输 液 管 。 然 后 继 续 向 三 通 管 内 推 注 ， 直至 充 满 压 力 传 感 器 的 上 方 支 管 ， 并 用 塞 子 塞 住 （ 注 意 ： 液 导 系 统 内 不 可 有 气 泡 ） 。继 续 向 三 通 管 内 推 注 ， 同 时 观 察 显 示 器 上 压 力 变 化 。 当 加 压 到 120mmHg 时 既 可关 闭 三 通 管 。 观 察 压 力 是 否 变 化 ， 如 果 压 力 下 降 ， 则 需 要 检 查 液 导 系 统 的 漏 液 原 因 ，并 重 新 制 压 。 调 节 血 压 显 示 器 的 灵 敏 度 ， 使 30130m
6、mHg 的 变 化 都 能 在 显 示 器 上明 显 的 反 映 出 来 。 将 动 脉 插 管 端 的 导 管 内 充 满 肝 素 溶 液 。3、 动 物 的 准 备（ 1） 按 照 实 验 4-9 方 法 ， 麻 醉 家 兔 并 进 行 颈 部 手 术 ， 插 入 气 管 插 管 、 分 离 主 动 脉神 经 。 同 时 分 离 迷 走 神 经 并 穿 线 备 用 。 再 将 止 血 钳 从 颈 总 动 脉 下 方 穿 过 ， 轻 轻 张 开止 血 钳 ， 分 离 出 23cm 长 的 颈 总 动 脉 。 分 离 出 的 颈 总 动 脉 外 壁 应 该 十 分 光 洁 ， 外 面并 无 结
7、 缔 组 织 及 脂 肪 等 物 。 在 动 脉 上 穿 两 条 备 用 棉 线 ， 分 别 打 上 活 结 。 将 两 线 分 别拉 至 分 离 出 的 动 脉 两 端 备 用 。 同 样 方 法 分 离 另 一 侧 血 管 与 神 经 （ 一 侧 动 脉 用 于 插 管侧 压 ， 另 侧 动 脉 实 验 用 ） 。 由 于 家 兔 的 品 种 不 同 ， 个 体 之 间 也 有 差 异 ， 常 发 现3 条 神 经 的 解 剖 位 置 有 些 变 异 。 主 动 脉 神 经 的 最 后 确 认 ， 蓄 意 对 血 压 的 影 响 为 准 。（ 2） 动 脉 插 管 首 先 用 5ml 注
8、射 器 从 耳 缘 静 脉 注 入 肝 素 （ 200U？ kg 体 重 ） 以 防凝 血 。 然 后 在 一 侧 动 脉 行 动 脉 插 管 术 以 记 录 血 压 。 其 方 法 如 下 ：将 动 脉 头 端 的 备 用 线 尽 可 能 靠 头 端 结 扎 （ 务 必 扎 紧 ， 以 防 渗 血 ） ， 然 后 在 另 一 备用 线 的 向 心 侧 （ 尽 可 能 近 心 端 ） ， 用 动 脉 夹 夹 闭 。 轻 轻 提 起 动 脉 头 端 的 结 扎 线 ， 用锐 利 的 眼 科 剪 在 靠 近 扎 线 的 稍 后 方 ， 沿 向 心 方 向 斜 向 剪 开 动 脉 上 壁 （ 注 意
9、 ： 不 可 只剪 开 血 管 外 膜 ， 也 切 勿 剪 断 整 个 动 脉 ， 剪 口 大 小 约 为 管 径 的 一 半 ） 。 一 手 持 弯 头 眼科 镊 ， 将 其 一 个 弯 头 从 剪 口 处 插 进 动 脉 少 许 ， 轻 轻 挑 起 剪 开 的 动 脉 上 壁 ， 另 一 手 将准 备 好 的 动 脉 插 管 由 开 口 处 插 入 动 脉 管 内 。 如 果 插 入 较 浅 ， 可 用 一 手 轻 轻 捏 住 进 入插 管 的 动 脉 管 壁 ， 另 一 手 拿 住 动 脉 插 管 ， 顺 势 轻 轻 推 进 至 68mm 左 右 （ 如 果 手 感滞 涩 ， 说 明 插
10、 管 并 未 进 入 动 脉 ， 必 须 退 出 插 管 ， 重 新 剪 口 再 插 ） ， 用 备 用 线 将 动 脉连 同 进 入 的 插 管 扎 紧 （ 插 管 不 可 因 扎 线 松 动 而 滑 出 ， 亦 不 可 漏 液 ） ， 并 将 余 线 系 在插 管 的 固 定 侧 支 上 ， 以 免 滑 脱 。 注 意 ： 插 管 应 与 动 脉 血 管 的 方 向 一 致 ， 以 防 插 管 尖端 扎 破 动 脉 管 壁 。 轻 轻 取 下 向 心 端 动 脉 夹 ， 可 见 动 脉 血 与 插 管 内 液 体 混 合 。 再 取 下通 向 压 力 传 感 器 的 止 血 钳 ， 此 时
11、 显 示 器 上 出 现 血 压 的 波 动 曲 线 。4、 实 验 观 察（ 1） 观 察 正 常 血 压 曲 线 调 节 扫 描 速 度 与 增 益 ， 可 以 明 显 地 观 察 到 心 室 射 血 与 主动 脉 回 缩 形 成 的 压 力 变 化 与 收 缩 压 、 舒 张 压 的 读 数 。 有 时 可 以 观 察 到 血 压 曲 线 随 呼吸 变 化 ， 心 搏 为 一 级 波 ， 呼 吸 波 为 二 级 波 。 然 后 将 扫 描 速 度 调 慢 ， 观 察 正 常 血 压 曲线 。（ 2） 轻 轻 提 起 对 侧 完 好 颈 总 动 脉 上 的 备 用 线 ， 用 动 脉 夹
12、夹 闭 30s（ 于 夹 闭 前 记录 动 脉 通 畅 时 的 血 压 曲 线 ） ， 观 察 并 记 录 血 压 变 化 。 出 现 变 化 后 即 取 下 动 脉 夹 ， 记录 血 压 的 恢 复 过 程 。（ 3） 记 录 对 照 血 压 曲 线 后 ， 用 手 指 按 压 颈 动 脉 窦 （ 下 颌 下 方 内 侧 ） ， 观 察 并 记 录 血压 变 化 。 当 血 压 明 显 下 降 时 ， 则 停 止 按 压 ， 待 血 压 恢 复 （ 如 果 血 压 反 而 升 高 ， 说 明按 压 的 是 血 管 ， 需 重 新 寻 找 按 压 位 置 ） 。（ 4） 刺 激 主 动 脉 神
13、 经 使 刺 激 输 出 端 连 接 保 护 电 极 ， 轻 轻 提 起 主 动 脉 神 经 上 的 备用 线 ， 小 心 地 将 神 经 置 于 保 护 电 极 之 上 。 记 录 对 照 血 压 曲 线 后 ， 再 用 中 等 强 度 的 连续 电 脉 冲 信 号 ， 通 过 保 护 电 极 ， 刺 激 神 经 1020s。 血 压 出 现 明 显 下 降 后 即 可 停 止刺 激 ， 并 待 血 压 恢 复 。 如 果 血 压 并 不 下 降 ， 可 调 整 刺 激 强 度 或 刺 激 频 率 再 行 刺 激 。任 何 刺 激 都 无 效 时 ， 则 表 示 此 神 经 并 非 主 动
14、脉 神 经 。 需 要 重 新 辨 认 神 经 后 再 行 实 验 。（ 5） 分 别 刺 激 主 动 脉 神 经 中 枢 端 和 外 周 端 双 结 扎 主 动 脉 神 经 后 （ 务 必 结 扎 ） ，从 两 扎 线 结 之 间 剪 断 神 经 。 记 录 对 照 血 压 后 ， 同 法 分 别 刺 激 神 经 的 中 枢 端 和 外 周 端 ，观 察 并 记 录 血 压 变 化 。（ 6） 刺 激 迷 走 神 经 记 录 对 照 血 压 后 ， 用 同 样 的 方 法 刺 激 迷 走 神 经 ， 观 察 血 压 下降 曲 线 与 （ 4） 有 何 不 同 （ 如 果 血 压 下 降 很
15、快 、 很 低 ， 应 立 即 停 止 刺 激 ） 。（ 7） 结 扎 并 剪 断 迷 走 神 经 同 时 结 扎 双 侧 迷 走 神 经 后 剪 断 ， 观 察 血 压 有 何 变 化 。（ 8） 刺 激 迷 走 神 经 外 周 端 分 别 刺 激 两 侧 迷 走 神 经 外 周 端 ， 观 察 并 记 录 血 压 变 化有 何 不 同 。（ 9） 肾 上 腺 素 对 血 压 的 影 响 记 录 对 照 血 压 曲 线 后 ， 用 1ml 注 射 器 ， 从 耳 缘 静脉 注 入 0.10.3ml 肾 上 腺 素 溶 液 ， 观 察 并 记 录 血 压 变 化 及 恢 复 曲 线 。（ 10
16、） 乙 酰 胆 碱 对 血 压 的 影 响 同 法 注 入 0.10.2ml 乙 酰 胆 碱 溶 液 ， 观 察 并 记 录注 射 前 后 血 压 变 化 。（ 11） 失 血 对 血 压 的 影 响 从 另 一 侧 动 脉 插 管 后 慢 慢 放 血 ， 观 察 放 血 量 对 血 压 的影 响 。5、 整 理 实 验 结 果 ， 并 将 实 验 结 果 填 入 下 表家 兔 血 压 实 验 记 录 表实 验 前 血 压 对 照 实 验 时 血 压 变 化 极值恢 复 稳 定 值夹 闭 另 一 侧 颈 总 动 脉按 压 颈 动 脉 窦刺 激 主 动 脉 神 经刺 激 主 动 脉 神 经 中
17、枢 端刺 激 主 动 脉 神 经 外 周 端剪 断 双 侧 迷 走 神 经刺 激 左 侧 迷 走 神 经 外 周 端刺 激 右 侧 迷 走 神 经 外 周 端注 入 肾 上 腺 素 溶 液注 入 乙 酰 胆 碱 溶 液失 血 1（ ml）失 血 2（ ml）失 血 3（ ml）【 思 考 题 】1、 讨 论 各 项 实 验 结 果 ， 说 明 血 压 正 常 及 发 生 变 化 的 机 理 。2、 如 何 证 明 主 动 脉 神 经 是 传 入 神 经 ？3、 如 何 证 明 迷 走 神 经 外 周 端 对 心 脏 有 调 节 作 用 ？4、 试 分 析 主 动 脉 神 经 放 电 与 血 压
18、 变 化 的 关 系 。5、 根 据 实 验 结 果 ， 说 明 神 经 、 药 物 对 心 率 与 呼 吸 的 影 响 。三、参数设置：（一）RM6240 系统：点击“实验”菜单，选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节” 。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：4 通道时间常数为直流，滤波频率 100Hz，灵敏度 12Kpa，采样频率 800Hz，扫描速度 500ms/div。连续单刺激方式，刺激强度 510V，刺激波宽 2ms，刺激频率 30 Hz。（二）实验内容1.正常血压曲线。2.夹闭右侧颈总动脉。3.刺激减压神经：（1）刺激完整减压神经 （2）刺激减压神经中枢端 （
19、3）刺激减压神经外周端。4.刺激迷走神经外周端。5.静脉注射 NE 0.5ml。（三）注意事项：1.分离减压神经注意：减压神经要从向心端开始往头端分离，避免损伤神经，分离时不使神经上带有结缔组织膜，分离后滴加生理盐水以防干燥，穿 2 根线备用。2.连接仪器：注意避免动脉插管滑出。3.夹闭颈总动脉时勿牵拉动脉（夹闭，血压增高；牵拉，血压下降）。4.刺激减压神经，如神经损伤，向头端移动（与减压神经放电移动方向相反）。5.刺激右侧迷走神经末梢端，血压.心率变化更为明显。三、实验报告要求：（10 分）1.实验结果： 各种影响因素引起动脉血压变化曲线图。（不要求观察定量变化）2.实验讨论：（各 1 分）
20、1）夹闭颈总动脉，血压升高：夹闭颈总动脉颈动脉窦血压下降颈动脉窦压力感受器受到刺激减弱窦神经传入冲动心迷走中枢（抑制）迷走神经传出冲动减少心跳加快.加强心输出量增多 减少心交感中枢（兴奋） 小静脉收缩回心血量增多 血压升高交感神经传出冲动增多 交感缩血管中枢（兴奋） 小动脉收缩外周阻力增大 2）刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化3）刺激迷走
21、神经末梢外周端，引起血压下降在实验中，多用刺激右迷走神经外周端，其中的副交感神经纤维兴奋，释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的 M 受体结合，产生负性变时，变力，变传导作用，出现心率减慢，心输出量下降，血压下降。4）静脉注射去甲肾上腺素后血压升高：实验结果 各种影响因素引起动脉血压变化曲线图结果分析1.夹闭一侧颈总动脉 15s 后，观察到兔动脉血压升高的现象：这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢，是动脉张力感受器。这个感受器位于兔颈总动脉的远心端，颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后，远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降，传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至
22、延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱，心交感和心缩血管紧张加强，作用于心脏，使心率加快，心输出量增加，血管收缩，血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。若血压下降过大，交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统，是静脉收缩，促进血液回心，使每博输出量增加。2.刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化。3.刺激迷走神经后观察到，刺激迷走神经和迷走神经外周端都
23、能引起明显的减压反应，而刺激迷走中枢端则没有减压反应，只是稍有轻微抬升变化：迷走神经中含从延髓下行的传出纤维，通向心脏。节前纤维末端释放 Ach,节后纤维末端释放 Ach,属于副交感神经纤维，能使 cAMP 浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。从而使心输出量变小，平均动脉压降低。此外，还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行，化学感受器受刺激的效应是血压升高。所以，刺激迷走中枢不能引起减压反应，却可以使血压轻微抬高。此外，若切断两侧迷走神经，迷走紧张消失，迷走吸气兴奋反射通路也断了，动物的吸气变深，周期变长，二级曲线周期性变得不明显。4.加入 0.2ml0.01%去甲肾上腺
24、素后，观察到平均动脉压抬高。这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的 和 2 甲肾上腺素能受体结合，使血管收缩，管径变小，外周阻力增加，从而使平均动脉压升高。此外，去甲肾上腺素还可以使心率增加，心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。5.加入 0.2ml0.01%乙酰胆碱后，观察到一级曲线周期变慢，平均动脉压下降。Ach 能使 cAMP 浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。心率变慢则流向外周的血量变多，舒张压更低。心房收缩力减弱则收缩压也有下降。平均动脉压降低。但是因为血回心时间变长，因此，回心血量较多，脉压增加。而大多数血管没有 Ach 受体，Ach 对外周阻力影响不大。兔动脉血压调节(
25、ZT)2008-07-29 17:53:27兔动脉血压调节 【实验目的】观察神经和体液因素对血压和心率的影响；学习哺乳动物动脉血压（blood pressure）的直接描记方法。【实验原理】心血管活动主要受神经、体液和自身调节。神经调节一般是通过反射(reflex)的形式实现的，包括压力感受性反射 (baroreceptor reflex)、心肺容量感受性( cardiopulmonary receptor) 反射、化学感受性 (chemoreceptor) 反射等，通过改变交感及副交感传出神经的紧张性活动，调节心血管机能；体液调节则涉及肾素血管紧张素系统（RAS）、肾上腺素和去甲肾上腺素、加
26、压素、内皮缩血管因子（EDCF）、内皮舒血管因子（EDRF）、激肽、前列腺素（PGs）等多个方面。本实验将通过观察血压和心率来反映心血管活动的变化。血液充盈、心脏射血和外周阻力是形成血压的基本因素，上述调节机制可通过作用于上述 3个方面，调节动脉血压。【实验动物】家兔 【实验器材和药品】BL-420E 生物机能实验系统，血压换能器，兔手术台，哺乳动物手术器械 1 套，注射器数支，小烧杯 1 个，丝线（黑色、白色粗线）若干。3戊巴比妥钠，生理盐水，0.3肝素，1：10,000 去甲肾上腺素, 5：100，000 肾上腺素， 1：100，000 乙酰胆碱。【实验方法和步骤】1.动物称重、耳缘静脉注
27、射 3%戊巴比妥钠 1ml/kg 麻醉，固定。 2.手术： (1)分离右侧减压神经、迷走神经和颈总动脉 作颈部正中切口 67cm，分离皮下组织及肌肉，将颈部气管旁软组织外翻，可见与气管平行的一侧血管神经丛, 即为颈总动脉鞘，包括了颈总动脉和伴行的三条神经最粗的迷走神经、最细的减压神经、交感神经。用玻璃分针分离出右侧减压神经、迷走神经和颈总动脉，各穿两根不同颜色的丝线备用。 (2)左侧颈总动脉分离、插管： 在气管左侧用玻璃分针分离出一段至少长 34cm 的颈总动脉，穿两根线备用。结扎远心端，在近心端夹上动脉夹（二者距 23cm）。在近远心端稍下方用眼科剪剪一“V”字形小口，插入预先灌满肝素的动脉
28、插管，用丝线固定。 3仪器连接：将连接动脉插管的血压换能器及刺激电极通过相应插孔连接在 BL-420E 系统的前面板上。打开 BL-420E 系统，选择项目“循环实验兔动脉血压调节”，记录血压。 4观察项目 (1)正常血压曲线描计： 常见的正常血压波型有：一级波，为心搏波，伴随心脏收缩、舒张出现的血压波动，频率与心率一致；二级波，为呼吸波，伴随呼吸运动的血压波动，频率与呼吸频率一致。另外，偶尔还可见到三级波，为一种低频、缓慢波动，可能与血管运动中枢周期性的紧张性变化有关。 (2)神经体液因素对血压、心率的影响 牵拉颈总动脉： 手持左侧颈总动脉远心端结扎线，向心脏方向以 25 次/秒有节奏的往复
29、牵拉，持续 510 秒，观察血压、心率变化。 夹闭颈总动脉： 用动脉夹夹闭右侧颈总动脉 510 秒，观察血压、心率变化。 刺激减压神经：用双极保护电极刺激右侧减压神经，观察血压、心率的变化。再用双线结扎减压神经，在结扎线中间剪断神经，以相同刺激参数分别刺激其中枢端和外周端，观察血压、心率的变化。 刺激迷走神经： 结扎并剪断右侧的迷走神经，分别刺激其外周端和中枢端，观察血压、心率变化。 去甲肾上腺素 由耳缘静脉注射 110,000 去甲肾上腺素 0.20.3ml，观察血压、心率变化。 肾上腺素 由耳缘静脉注射 5100,000 肾上腺素 0.20.4ml，观察血压、心率变化。 乙酰胆碱 由耳缘静脉注射 1100,000 去甲肾上腺素 0.20.3ml，观察血压、心率变化。【结果与分析】1.正常血压2.夹闭颈总动脉 血压升高
