选修三重要知识点整理第一章 基因工程1.限制性核酸内切酶（限制酶）主要从原核生物（用于切割外源DNA，保护自身）中分离纯化出来，识别序列由6个核苷酸（或4、5、8个）组成。末端种类：平末端和黏性末端2.DNA连接酶效率低3. 运载体 (1)作用：作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。(2)种类：质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒等。(3)条件：有一个或多个限制酶切位点能自我复制有标记基因（4）一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此在基因工程中，对某些天然的载体进行人工改造。4.基因工程中形成的重组DNA是DNA分子片段的连接，而不是合成DNA分子或转录合成mRNA的过程5.DNA连接酶:不需要模板DNA聚合酶:需要模板 DNA复制时 都形成磷酸二脂键6.基因操作程序：获取目的基因构建表达载体（核心）导入受体细胞目的基因的检测与鉴定获得目的基因（1）基因组文库（所有的）部分基因文库（部分的），如cDNA文库（2）PCR技术扩增目的基因原理：DNA复制 指数方式增加需要：模板DNA，原料（游离的四种脱氧核苷酸），引物，DNA聚合酶（）
