生物系统中mRNA或DNA等目标核酸分子的分析鉴定必须回答如下三个基本问题: 目标核酸分子是否存在于实验标本中。 实验标本中目标核酸分子的含量是多少。 实验标本中目标核酸分子的序列如何;以及与其他实验标本中的情况比较,目标核酸分子的序列是否有变化。核酸实验研究技术进展11证明目标核酸分子是否存在于实验标本中的基本实验方法:1)杂交法,2)PCR法,3)测序法。核酸实验研究技术进展121) 杂交法:序列已知,同时还要合成一个标记了的特异性探针。q Dot blotting:不经过电泳,直接把检测样本点在一个适宜载体上,针对目标DNA分子或RNA分子进行杂交检测。q Southern blotting:在电泳后,针对目标DNA分子的杂交检测。q Northern blotting:在电泳后,针对目标RNA分子的杂交检测。q 目标DNA分子原位杂交检测。q 目标RNA分子原位杂交检测。核酸实验研究技术进展13杂交法的优点与缺点:q 优点: Dot blotting:简单实用,适于进行大样本数同时检测。 Northern blotting:如果检测结果阳性,其可信度要远远高于RT-PCR,因此