实时荧光定量PCR技术的原理及应用(Real time Quantitative PCR)讲 座 提 纲q 实时荧光定量PCR原理q 实时荧光定量PCR的几种方法介绍q 实时荧光定量PCR医学和科研中的应用q 实时荧光定量PCR原理q 实时荧光定量PCR的几种方法介绍q 实时荧光定量PCR医学和科研中的应用实时荧光定量PCR定义 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 实时荧光定量PCR 原理 实时原理 常 规 PCR技术： 对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析 无法对起始模板准确定量，无法对扩增反应实时检测实时定量PCR技术： 利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析实时荧光定量PCR原理 定量原理介绍三个概念： 扩增曲线、荧光阈值、Ct值如何对起始模板定量？通过Ct值和标准曲线对起始模板进行定量分析实时荧光定量PCR 原理 - 扩增曲线扩增曲线图： 横坐标：扩增循环数（Cycle）；纵坐标：荧光强度 每个循环进行一次荧光
