A 型口蹄疫液相阻断ELISA2015 年12 月1 a一、液相阻断ELISA 基础知识n 液相阻断ELISA (LB-ELISA )通途:n 1 、检测口蹄疫感染,广泛用于国际贸易中,是OIE 指定方法之一;n 2 、监测牛、羊和猪等偶蹄动物血清中口蹄疫免疫效价,评价口蹄疫疫苗免疫效果。2 aBL-ELISA 原理图待检血清与病毒抗原混合液捕获抗体检测抗体病毒酶结合物显色液阳性不显色阴性显黄色3 an BL-ELISA 反应原理:n 将预先滴定好的病毒抗原与被检血清首先在液相中反应,然后将抗原抗体复合物转移到包被了口蹄疫特异性抗体的ELISA 板中,没有完全被血清抗体阻断的病毒抗原被ELISA 板中的抗体捕获,再通过酶结合物与底物显色。按照实验孔呈现颜色与抗原对照(未加血清)孔呈现颜色相比较判定结果。n 抗体滴度以阻断50% 病毒抗原的血清稀释度表示。4 a二、实验前准备n 1 、使用前,试剂盒所有组份应回复到18-26 ,试剂要混合均匀,每个样品使用一个吸头。n 2 、浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水25 倍稀释。5 a三、实验操作步骤n 1 、抗原抗体反应布板6 a图 2 96 孔酶