课题3 血红蛋白的提取与分离(I)教学目标教学重点教学难点1. 理解色谱法、电泳法等分离大分子的基本原理2. 了解缓冲液的组成及其作用 3. 血红蛋白的分离样品处理凝胶色谱法的原理电泳法分离大分子的原理课题3 血红蛋白的提取与分离(I)一、基础知识蛋白质提取和分离原理 蛋白质提取与分离的依据蛋白质的物化理性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别。 提取分离方法凝胶色谱法 凝胶电泳法 课题3 血红蛋白的提取与分离(I)1.凝胶色谱法 (1)原理:(2)材料大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部,路程长,流动慢。多孔性的多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。 课题3 血红蛋白的提取与分离(I)1.凝胶色谱法 (3)分离过程 混合物上 柱洗脱大分子流动快小分子流动慢收 集大分子收 集小分子 洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液, 促使蛋白质分子的差速流动。 课题3 血红蛋白的提取与分离(I)由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成。如H2CO3/NaHCO3,HC/NaC,NaH2PO4/Na2HPO4等1.凝胶色谱法 (4)缓冲溶液洗脱剂组成:配制