基因克隆简介1一.DNA分子克隆的基本原理v 基因克隆（genecloning）或分子克隆,又称为重组技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源的DNA分子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子，并使之在适当的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代DNA分子的过程。v 克隆（clone）一指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程(cloning)。2一个完整的基因克隆过程包括以下步骤v .获得待克隆的DNA片段（基因）；.目的基因与载体在体外连接；.重组DNA分子导入宿主细胞；.筛选、鉴定阳性重组子；.重组子的扩增与或表达。3 1.从生物有机体基因组中，分离出带有目的基因的DNA片段。 2.将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制的并具有选择记号的载体分子上，形成重组DNA分子。 3.将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（亦称寄主细胞）并与之一起增殖。 4.从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞，并筛选出已经得到扩增的目的基因。 5.将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人
