PCR引物设计原理PCRPCR反应一般由三个步骤组成反应一般由三个步骤组成：模板的热变性模板的热变性；引物复性到单链模板上引物复性到单链模板上；热稳定热稳定DNADNA聚合酶催化的聚合酶催化的延伸延伸变性变性p在应用在应用 Taq DNA Taq DNA 聚合酶进行聚合酶进行 PCR PCR 时，变性时，变性温度在温度在94-9594-95下进行，这也是下进行，这也是Taq DNATaq DNA聚合聚合酶进行酶进行3030个或个或3030个以上个以上PCRPCR循环而活力不受到循环而活力不受到过多损失时能耐受的最高温度。过多损失时能耐受的最高温度。p有时把变性时间设计为有时把变性时间设计为 5min5min，以便大分子模，以便大分子模板板 DNA DNA 彻底变性的概率。彻底变性的概率。p对于对于 GC GC 含量为含量为 55%55%或更低的线性或更低的线性 DNA DNA 模模板，推荐板，推荐 PCR PCR 的变性条件是的变性条件是 94-95 94-95 变性变性45s45s。复性温度（复性温度（退火温度退火温度）至关重要！）至关重要！退火温度太高，退火温度太高，引物不能与模板
