第一节第一节 扩增法获得目的基因扩增法获得目的基因 第六章第六章 目的基因克隆目的基因克隆本节要点本节要点 法法 的步骤的步骤 三种不同引物引导的三种不同引物引导的 已知基因已知基因N端部分序列端部分序列其它法其它法 反向反向 锚定锚定 连接介导的连接介导的 盒式盒式 第一节第一节 扩增法获得目的基因扩增法获得目的基因 一、法第一节第一节 扩增法获得目的基因扩增法获得目的基因 1.1.的步的步骤骤反转录反转录扩扩增增获得模板获得模板反转录反转录 ：将反转录成第：将反转录成第一链一链常用模板常用模板常采用异硫氰酸胍常采用异硫氰酸胍-酚酚-氯仿一氯仿一步抽提法步抽提法提取的总中只有少部分是，大提取的总中只有少部分是，大部分为和部分为和 第一节第一节 扩增法获得目的基因扩增法获得目的基因 是一种新型总抽提试剂，含是一种新型总抽提试剂，含有苯酚、异硫氰酸胍等物质有苯酚、异硫氰酸胍等物质.细胞总细胞总采用亲和层析法采用亲和层析法第一节第一节 扩增法获得目的基因扩增法获得目的基因 ()()纤维纤维素柱分离素柱分离纯纯化化真真核核 基因特异引物（基因特异引物（，），）多聚寡核苷酸引物（多聚寡核苷酸引
